Perbedaan utama antara kolom hypersil dan inertsil adalah bahwa kolom hypersil adalah nama dagang untuk kolom BDS sedangkan kolom inertsil adalah nama dagang untuk kolom ODS. Kolom ODS adalah jenis kolom HPLC fase terbalik yang mengandung gugus fungsi –OH bebas sedangkan kolom BDS adalah jenis lain dari kolom HPLC fase terbalik yang telah memblokir gugus –OH.
Reverse-phase HPLC adalah teknik kromatografi yang menggunakan fase diam hidrofobik. Fase diam ini bekerja dengan baik untuk retensi sebagian besar analit organik. Fase gerak HPLC fase terbalik bersifat polar. Ada berbagai jenis kolom yang digunakan untuk teknik kromatografi ini. Hypersil (atau BDS) dan inertsil (atau ODS) adalah dua kolom tersebut.
Apa itu Kolom Hypersil?
Kolom Hypersil atau kolom BDS adalah jenis kolom HPLC fase terbalik yang telah memblokir gugus –OH. Dengan kata lain, gugus hidroksil dalam kolom ini dinonaktifkan/tidak bebas. Kami juga menyebutnya kolom BDS C18 karena kolom ini dikemas dengan rantai octadecasilane. Istilah BDS adalah singkatan dari Base Deactivated Silica; dengan demikian, kita juga dapat menamai kolom ini sebagai kolom endcap.
Kolom ini sangat penting dalam kromatografi karena gugus silanol residunya dinonaktifkan dengan capping. Oleh karena itu, aktivitas silanol residu minimal. Selain itu, kolom ini khusus untuk analisis senyawa basa. Di sini, basa bereaksi dengan gugus Si-OH dalam kemasan silika. Kolom BDS dirancang untuk mengurangi tailing puncak, yang merupakan masalah utama dalam kromatografi (tidak dapat mengenali puncak tertentu).
Apa itu Kolom Inertsil?
Kolom inertsil atau kolom ODS adalah jenis kolom HPLC fase terbalik yang mengandung gugus fungsi –OH bebas. Kita dapat menyingkatnya sebagai kolom C18 karena mengandung rantai octadecasilane. Dengan kata lain, kita dapat mengisi kolom C18 dengan pengepakan gugus oktadesisil (ini juga disebut sebagai gugus ODS atau gugus C18) yang secara kimia terikat pada pembawa gel silika. Kolom ODS hypersil ini secara khusus penting dalam teknik kromatografi fase terbalik. Selanjutnya, kolom jenis ini memiliki nomor pelat teoritis yang tinggi dan juga menunjukkan kesetimbangan yang cepat. Karena kolom ini hanya membutuhkan biaya rendah untuk beroperasi, kolom ini biasanya digunakan dalam kromatografi fase terbalik.
Gambar 1: Instrumen HPLC
Namun, ada beberapa kelemahan penggunaan kolom ODS ini dalam kromatografi. Misalnya, elusi keseluruhannya terlalu cepat, sehingga sulit untuk memisahkan beberapa komponen dalam campuran, dan stabilisasi kolom membutuhkan waktu yang relatif lama.
Ketika mempertimbangkan struktur kimia kolom ODS, ia memiliki gugus hidroksil (-OH) yang melekat pada permukaan pembawa gel silika di mana ia memiliki struktur Si-OH. Struktur ini dikenal sebagai "silanol". Pada pengepakan kolom ODS, pengepakan dilakukan dengan cara mengikat gugus ODS dengan silanol melalui reaksi kimia. Kelompok ODS ini berukuran besar dan tidak terlalu reaktif. Oleh karena itu, banyak gugus silanol yang tidak bereaksi ada di kolom ini. Namun, silanol bebas ini dapat menyebabkan kesalahan selama analisis, jadi kami harus menutup gugus ini dengan beberapa senyawa lain seperti gugus TMS (trimetilsilil), yang tidak besar tetapi sangat reaktif. Proses ini disebut end-capping.
Apa Perbedaan Kolom Hipersil dan Kolom Inertsil?
Kolom hipersil dan inertsil adalah nama dagang, dan ini adalah kolom HPLC fase terbalik yang penting. Perbedaan utama antara kolom hypersil dan inertsil adalah bahwa kolom hypersil adalah nama dagang untuk kolom BDS sedangkan kolom inertsil adalah nama dagang untuk kolom ODS. Kolom hipersil atau kolom BDS adalah jenis kolom HPLC fase terbalik yang telah memblokir gugus –OH. Kolom inertsil atau kolom ODS adalah jenis kolom HPLC fase terbalik yang mengandung gugus fungsi –OH bebas.
Infografik di bawah ini merangkum perbedaan antara kolom hipersil dan kolom inertsil dalam bentuk tabel.
Ringkasan – Kolom Hypersil vs Inertsil
Kolom hipersil dan inertsil adalah nama dagang, dan ini adalah kolom HPLC fase terbalik yang penting. Perbedaan utama antara kolom hypersil dan inertsil adalah bahwa kolom hypersil adalah nama dagang untuk kolom BDS sedangkan kolom inertsil adalah nama dagang untuk kolom ODS.
