Perbedaan utama antara vektor kloning dan vektor ekspresi adalah bahwa vektor kloning membawa fragmen DNA asing ke dalam sel inang sementara vektor ekspresi memfasilitasi ekspresi gen menjadi protein.
Vektor adalah istilah penting dalam biologi molekuler. Dalam teknologi DNA rekombinan, peran utama vektor adalah menyediakan mode transportasi ke fraksi DNA yang berguna untuk dimasukkan ke dalam sel inang. Selain itu, ini adalah molekul DNA yang digunakan untuk membawa fragmen DNA asing secara artifisial ke dalam sel inang untuk diekspresikan atau direplikasi. Vektor yang paling banyak digunakan adalah plasmid, vektor virus, kosmid dan kromosom buatan. Vektor kloning dan vektor ekspresi adalah dua jenis vektor yang diklasifikasikan berdasarkan aplikasinya.
Apa itu Vektor Kloning?
Vektor kloning adalah fraksi DNA yang dapat digunakan untuk menyisipkan molekul DNA asing dan memiliki kemampuan untuk dimasukkan ke dalam inang untuk tujuan kloning. Karakteristik ideal dari vektor kloning adalah penyisipan/penghapusan fragmen DNA yang mudah dengan perlakuan enzim restriksi dan perlakuan enzim ligating. Dalam aspek ini, vektor kloning yang sering digunakan adalah plasmid hasil rekayasa genetika.
Gambar 01: Vektor Kloning
Vektor kloning harus memiliki beberapa situs kloning, gen penanda yang dapat dipilih, dan gen reporter. Tujuan dari situs kloning adalah untuk menyediakan tempat untuk kloning terjadi. Gen penanda yang dapat dipilih membantu mengidentifikasi rekombinan yang berhasil setelah kloning dan gen reporter memungkinkan penyaringan dan mengidentifikasi rekombinan yang benar di antara rekombinan setelah kloning. Vektor kloning tidak selalu membantu untuk mengekspresikan protein yang dikodekan oleh DNA asing. Jadi, satu-satunya tujuan vektor kloning adalah untuk membawa DNA asing ke inang.
Apa itu Vektor Ekspresi?
Vektor ekspresi, juga disebut konstruksi ekspresi, adalah jenis vektor yang digunakan untuk ekspresi protein di dalam sel inang. Seperti vektor apapun, ini juga harus berisi bagian utama situs kloning ganda, gen penanda dan gen reporter. Vektor memperkenalkan gen baru ke dalam inang dan menggunakan mekanisme sintesis protein inang, memungkinkan gen untuk diekspresikan ke dalam inang. Selain itu, fokus awalnya adalah membuat m-RNA stabil dan dengan demikian membuat protein. Salah satu contoh yang baik adalah produksi komersial insulin. Gen insulin diperkenalkan ke plasmid bakteri dan dimasukkan kembali ke E. coli.tubuh bakteri coli, memungkinkan plasmid berkembang biak dan memungkinkan E. coli tumbuh, mensekresi insulin yang dapat dikumpulkan dan digunakan.
Gambar 02: Vektor Ekspresi
Selanjutnya, vektor ekspresi harus memiliki wilayah promotor yang kuat, urutan inisiasi terjemahan yang benar, dan kodon terminator dan urutan yang benar. Vektor ekspresi memiliki banyak aplikasi dalam memproduksi peptida dan protein untuk industri farmasi seperti memproduksi insulin, hormon pertumbuhan, antibiotik, vaksin, antibodi. Selain itu, vektor ekspresi membantu dalam produksi enzim dalam industri makanan dan garmen. Tidak hanya itu, vektor ekspresi sangat penting dalam menghasilkan tanaman transgenik seperti padi emas, tanaman tahan serangga, tanaman tahan herbisida, dll.
Apa Persamaan Antara Vektor Kloning dan Vektor Ekspresi?
- Vektor kloning dan vektor ekspresi adalah dua jenis vektor yang kami gunakan dalam teknologi DNA rekombinan dan rekayasa genetika.
- Keduanya mengandung gen penanda dan gen reporter.
- Selain itu, mereka terdiri dari beberapa situs kloning.
- Juga, mereka memiliki asal replikasi, dan kemampuan untuk mereplikasi sendiri.
Apa Perbedaan Antara Vektor Kloning dan Vektor Ekspresi?
Vektor kloning adalah molekul DNA kecil yang membawa fragmen DNA asing ke dalam sel inang sedangkan vektor ekspresi adalah jenis vektor yang memfasilitasi pengenalan, ekspresi gen, dan produksi protein. Jadi, inilah perbedaan utama antara vektor kloning dan vektor ekspresi. Lebih jauh, perbedaan signifikan lainnya antara vektor kloning dan vektor ekspresi adalah bahwa vektor kloning memasukkan fragmen DNA asing ke dalam inang sementara vektor ekspresi mengekspresikan gen yang diperkenalkan dengan memproduksi protein yang relevan.
Selanjutnya, vektor kloning terdiri dari asal replikasi, situs restriksi, dan penanda yang dapat dipilih. Sedangkan vektor ekspresi mengandung enhancer, daerah promotor, kodon terminasi, urutan inisiasi transkripsi, asal replikasi, situs restriksi, dan penanda yang dapat dipilih. Oleh karena itu, ini juga merupakan perbedaan antara vektor kloning dan vektor ekspresi. Selain itu, plasmid, bakteriofag, kromosom buatan bakteri, kosmid, kromosom buatan mamalia, kromosom buatan ragi, dll, adalah contoh vektor kloning. Sedangkan vektor ekspresi sebagian besar adalah plasmid.
Ringkasan – Vektor Kloning vs Vektor Ekspresi
Berdasarkan fungsinya dalam biologi molekuler, ada dua jenis vektor yaitu vektor kloning dan vektor ekspresi. Vektor kloning adalah molekul DNA kecil yang mengirimkan DNA asing ke dalam sel inang. Ada berbagai jenis vektor kloning seperti plasmid, bakteriofag, kromosom buatan bakteri, kosmid, dan kromosom buatan mamalia. Sebaliknya, vektor ekspresi adalah plasmid yang memperkenalkan gen yang diinginkan ke dalam sel inang dan memfasilitasi ekspresi gen untuk mendapatkan produk protein. Vektor ekspresi adalah plasmid. Jadi, ini adalah ringkasan perbedaan antara vektor kloning dan vektor ekspresi.
