Perbedaan Kunci – Pewarnaan Gram vs Kultur
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan yang dilakukan untuk membedakan bakteri menjadi dua kelompok berdasarkan ketebalan lapisan peptidoglikan pada dinding selnya. Kultur adalah metode menumbuhkan dan memelihara mikroorganisme di bawah kondisi laboratorium untuk analisis yang berbeda. Perbedaan utama antara pewarnaan gram dan kultur adalah fungsinya; strain gram teknik pewarnaan bakteri dimana kultur adalah metode pertumbuhan dan pemeliharaan mikroorganisme.
Apa itu Pewarnaan Gram?
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial penting yang digunakan untuk identifikasi bakteri dalam Mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh Ahli Bakteriologi Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Pewarnaan Gram mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok besar: gram positif dan gram negatif; ini sangat penting dalam klasifikasi dan identifikasi bakteri. Pewarnaan gram dilakukan sebagai langkah awal untuk karakterisasi bakteri.
Bakteri dikelompokkan berdasarkan perbedaan dinding selnya. Bakteri gram positif mengandung lapisan peptidoglikan yang tebal pada dinding selnya sedangkan bakteri Gram negatif mengandung lapisan peptidoglikan yang tipis pada dinding selnya seperti terlihat pada gambar 01. Hasil pewarnaan gram akan didasarkan pada perbedaan ketebalan lapisan peptidoglikan bakteri tersebut. dinding sel.
Gambar 1: Bakteri Gram positif dan bakteri Gram negatif
Pewarnaan gram dilakukan dengan menggunakan empat reagen yang berbeda yaitu; pewarna primer, mordan, zat penghilang warna, dan pewarna penghitung. Crystal violet dan safranin masing-masing berfungsi sebagai pewarna primer dan counter, sedangkan gram yodium dan alkohol 95% masing-masing berfungsi sebagai mordan dan penghilang warna.
Langkah Dasar Pewarnaan Gram
- Apusan bakteri disiapkan pada kaca objek yang bersih, difiksasi dengan panas dan didinginkan.
- Smear dibanjiri kristal violet selama 1 – 2 menit.
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat untuk menghilangkan noda berlebih.
- Gram yodium dioleskan ke apusan selama 1 menit.
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir perlahan
- Smear dicuci dengan alkohol 95% selama 2 – 5 detik dan dibilas dengan air keran yang mengalir perlahan.
- Smear diwarnai dengan safranin selama 1 menit
- Smear dibilas dengan air keran yang mengalir lambat, dikeringkan dan diamati di bawah mikroskop.
Pada akhir pewarnaan gram akan terlihat bakteri gram negatif berwarna pink sedangkan pada bakteri gram positif akan terlihat warna ungu seperti pada Gambar 02. Hasil pewarnaan gram ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding selnya. Selama tahap penghilangan warna, noda primer dan mordan mudah dihilangkan dari bakteri gram negatif dan menjadi tidak berwarna karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis. Pewarnaan primer dipertahankan pada bakteri gram positif karena mereka memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal. Pewarnaan counter tidak akan efektif untuk bakteri gram positif karena retensi dari pewarna primer. Maka bakteri gram positif akan terlihat pada warna primer yaitu warna ungu. Counter stain akan menodai bakteri gram negatif dan akan terlihat pada warna pick yaitu warna safranin. Oleh karena itu, mudah untuk mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok berdasarkan pewarnaan gram dan sangat berharga dalam diferensiasi dan identifikasi bakteri.
Gambar 2: Strain Gram
Apa itu Budaya?
Kultur mikroba adalah metode kultur dan pemeliharaan mikroorganisme di bawah kondisi laboratorium untuk tujuan yang berbeda. Kultur ditumbuhkan dalam media padat, semi padat dan cair berdasarkan jenis dan tujuan kultur mikroorganisme. Kultur disediakan dengan nutrisi yang diperlukan dan kondisi pertumbuhan yang dibutuhkan oleh mikroorganisme. Ada komponen yang berbeda dari media kultur seperti sumber energi, sumber karbon, sumber nitrogen, mineral, mikronutrien, air, zat pemadatan, dll. Suhu optimal, oksigen dan pH harus disesuaikan dengan jenis mikroorganisme yang tumbuh.
Ada berbagai jenis kultur mikroba; misalnya kultur batch, kultur kontinyu, kultur tusuk, kultur plat agar, kultur kaldu, dll. Menurut komposisi media tanam, ada berbagai jenis media kultur yang dikenal sebagai media sintetis, media semi-sintetik dan media alami. Kultur mikroba disiapkan dalam kondisi steril di dalam ruang khusus yang disebut aliran udara laminar. Media tumbuh dan peralatan gelas disterilkan sebelum inokulasi mikroorganisme yang diinginkan. Dalam kondisi steril yang tepat, mikroorganisme target dipindahkan ke dalam media nutrisi yang disterilkan dan diinkubasi pada suhu optimal. Di dalam media, mikroorganisme akan tumbuh dan berkembang biak menggunakan nutrisi yang disediakan.
Gambar 3: Kultur bakteri di piring
Apa perbedaan antara Pewarnaan Gram dan Kultur?
Noda Gram vs Budaya |
|
| Gram strain adalah teknik pewarnaan diferensial yang digunakan untuk diferensiasi dan identifikasi bakteri. | Kultur mikroba adalah metode menumbuhkan mikroorganisme di laboratorium. |
| Komponen | |
| Ini menggunakan reagen yang berbeda termasuk dua noda. | Ini menggunakan media kultur yang berbeda seperti media padat, semi padat dan cair yang terdiri dari nutrisi dan kondisi lain yang diperlukan. |
| Fungsi Dasar | |
| Ini memungkinkan pengelompokan bakteri menjadi dua kelompok: gram negatif dan gram positif. | Ini memungkinkan perbanyakan mikroorganisme untuk tujuan yang berbeda. |
| Dasar | |
| Hasil pewarnaan Gram didasarkan pada perbedaan lapisan peptidoglikan dinding sel. | Mikroorganisme akan tumbuh dan berkembang biak di dalam media kultur. |
| Hasil | |
| Bakteri gram negatif terlihat berwarna pink dan bakteri gram positif berwarna ungu. | Di piring, koloni mikroorganisme dapat dilihat. Pada media cair, mikroorganisme berada dalam bentuk tersuspensi. |
Ringkasan – Pewarnaan Gram vs Kultur
Kultur mikroba disiapkan dan dipelihara di bawah kondisi laboratorium untuk tujuan yang berbeda seperti penyimpanan, pengujian, pemurnian kimia, dll. Pewarnaan Gram adalah prosedur pewarnaan yang membedakan bakteri menjadi dua kelompok utama yang disebut bakteri gram negatif dan bakteri gram positif. Oleh karena itu, perbedaan antara pewarnaan gram dan kultur adalah bahwa pewarnaan gram adalah teknik pewarnaan bakteri sedangkan kultur adalah metode pertumbuhan dan pemeliharaan mikroorganisme di laboratorium.
