Perbedaan Kunci – Transfeksi Transien vs Stabil
Transfeksi adalah proses yang terlibat dalam transfer gen sel eukariotik menggunakan metode kimia atau fisik. Transfeksi dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis utama yang disebut transfeksi transien dan transfeksi stabil. Selama transfeksi sementara, gen yang diinginkan gagal untuk berintegrasi dengan genom inang dan diekspresikan secara temporal di dalam inang untuk jangka pendek sedangkan, dalam transfeksi yang stabil, gen yang diinginkan berintegrasi dengan genom inang dan dipertahankan untuk jangka panjang dalam beberapa generasi.. Ini adalah perbedaan utama antara transfeksi sementara dan stabil. Dalam kedua kasus, transfeksi berhasil, dan gen diekspresikan.
Apa itu Transient Transfection?
Transfeksi adalah alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara dua jenis transfeksi, transfeksi transien adalah cara umum dalam transfer gen. Melalui vektor, gen asing ditransformasikan di dalam sel inang. Begitu DNA asing memasuki sel inang, ia memiliki dua pilihan. Itu dapat berintegrasi dengan genom inang dan bereplikasi, atau tetap di dalam tanpa berintegrasi ke dalam genom. Transfeksi transien menunjukkan ekspresi sementara dari gen yang dimasukkan tanpa berintegrasi ke dalam genom inang. Gen mengekspresikan dan menghasilkan protein berkode sampai sel membelah. Namun, karena ketidakmampuan integrasi, tidak dapat mereplikasi dan masuk ke generasi mendatang. Jenis transfeksi ini berhasil untuk periode waktu yang singkat. Selama pembelahan sel atau karena beberapa faktor lain, DNA asing mengalami degradasi. Transfeksi transien ditunjukkan ketika DNA asing dalam bentuk DNA yang sangat melingkar.
Gambar 01: Transient Transfection
Apa itu Transfeksi Stabil?
Transfeksi yang stabil menunjukkan keberhasilan integrasi gen asing ke dalam genom inang. Begitu DNA asing masuk ke dalam sel inang, bagian dari DNA asing itu berintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya. Oleh karena itu, DNA asing juga bereplikasi dan diteruskan ke generasi mendatang ketika genom inang bereplikasi. Jenis transfeksi ini kompleks dan langka. Namun, karena transfeksi yang stabil ke dalam genom, sifat ini dipertahankan untuk jangka waktu yang lebih lama dari beberapa generasi.
Transfeksi yang stabil adalah proses yang sulit dan membutuhkan pengiriman DNA yang efektif dan akuisisi sel DNA asing ke dalam genomnya. Oleh karena itu, DNA linier lebih menyukai transfeksi yang stabil daripada DNA sirkular. Namun, tingkat transfeksi yang stabil kira-kira satu dari 104 sel yang ditransformasi. Transfeksi yang stabil dapat diamati dengan kotransfomasi penanda yang dapat dipilih dan melakukan seleksi buatan pada media.
Gambar 02: Transfeksi Stabil
Apa perbedaan antara Transien dan Transfeksi Stabil?
Transfeksi Transien vs Stabil |
|
| DNA asing tidak berintegrasi ke dalam genom inang. | DNA asing terintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya. |
| Replikasi dalam Host | |
| Gen yang ditransfusikan secara sementara tidak bereplikasi di dalam inang. Oleh karena itu gen tidak diturunkan ke generasi berikutnya. | Gen direplikasi dalam host dan diteruskan ke generasi mendatang. |
| Durasi waktu Ekspresi Gen | |
| Gen diekspresikan untuk jangka waktu yang terbatas dan setelah itu, mereka dihancurkan. | Gen menjadi bagian dari genom dan diekspresikan dalam generasi untuk jangka waktu yang lama. |
| Gunakan | |
| Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi jangka pendek dari gen atau produk gen. | Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi gen jangka panjang. |
| Deteksi Transfeksi | |
| Gen diekspresikan dan dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan gen reporter. | Transfeksi yang stabil dapat dengan mudah dideteksi dengan menyisipkan penanda yang dapat dipilih dan memilih melalui seleksi buatan pada media. |
| Kejadian dan Proses | |
| Transfeksi sementara adalah umum dan tidak rumit untuk dilakukan. | Transfeksi stabil jarang terjadi dan rumit untuk dilakukan. |
| Sifat DNA | |
| DNA yang sangat superkoil cocok untuk transfeksi sementara. | DNA linier cocok untuk transfeksi yang stabil. |
| Aplikasi | |
| Ini digunakan untuk studi knockdown gen atau pembungkaman dengan RNA penghambat, produksi protein dalam skala kecil | Ini digunakan untuk produksi protein dalam skala besar, studi farmakologi jangka panjang, terapi gen, penelitian tentang mekanisme regulasi genetik jangka panjang |
Ringkasan – Transfeksi Transien vs Stabil
Transfeksi transien dan stabil adalah dua jenis transfeksi yang ditunjukkan selama transfer gen ke sel eukariotik oleh sistem berbasis non-virus. DNA asing yang diubah tidak terintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi sementara sementara itu terintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi stabil. DNA melingkar melingkar ditunjukkan transfeksi sementara sedangkan DNA linier lebih memilih transfeksi stabil. Inilah perbedaan antara transfeksi sementara dan stabil. Namun transfeksi transien lebih umum dan mudah dibandingkan dengan transfeksi stabil. Tetapi pemilihan satu di antara dua tergantung pada tujuan transfer gen dan durasi proyek penelitian.
