Transformasi vs Transfeksi
Transformasi dan transfeksi adalah dua teknik sederhana yang digunakan untuk memasukkan gen asing ke dalam sel inang. Namun, teknik ini bergantung pada jenis host atau sistem vektor.
Apa itu Transformasi Sel?
Transformasi adalah teknik yang digunakan untuk memasukkan gen ke dalam sel ragi dan bakteri. Teknik ini biasanya menyebabkan perubahan gen yang diwariskan, dan dengan demikian ekspresi gen bersifat permanen. Transformasi bakteri pertama kali diperkenalkan pada tahun 1928 oleh Frederick Griffith. Kemudian pada awal 1970-an, teknik ini digunakan di E.koli. Selama proses transformasi E. coli, sel-sel direndam dalam larutan dingin CaCl2 Langkah ini membuat sel E.coli kompeten. Setelah itu, sel kompeten dicampur dengan DNA plasmid dan diinkubasi di atas es selama 20-30 menit. Kemudian kejutan panas singkat diberikan untuk memungkinkan transfer DNA ke dalam sel. Akhirnya, sel-sel ditempatkan dalam kaldu nutrisi dan diinkubasi pada 37 ° C selama 60-90 menit untuk membentuk plasmid. Setelah langkah-langkah ini berhasil diselesaikan, sel-sel yang diubah dapat ditempatkan pada media yang sesuai untuk perbanyakan sel. Karena transformasi dianggap sebagai teknik yang tidak efisien, maka tidak dapat digunakan untuk persiapan bank kloning.
Apa itu Transfeksi Sel?
Transfeksi adalah metode pengenalan gen asing, biasanya, ke dalam sel mamalia. Ada dua metode transfeksi; yaitu, transfeksi sementara dan transfeksi stabil. Dalam transfeksi transien, ekspresi gen tersedia untuk waktu yang terbatas; dengan demikian, perubahan gen menyebabkan ekspresi sementara. Metode transfeksi ini sederhana dan cepat; sehingga dapat digunakan secara rutin. Salah satu kelemahan transfeksi transien adalah sulitnya menerapkan sistem sintesis protein skala besar.
Selama transfeksi stabil, gen target diintegrasikan ke dalam genom sel inang, dan dengan demikian ekspresi gen bersifat permanen, tidak seperti transfeksi sementara.
Apa perbedaan antara Transformasi dan Transfeksi?
• Transformasi adalah pengenalan gen ke dalam sel prokariotik (bakteri dan ragi), sedangkan transfeksi biasanya disebut pengenalan gen ke dalam sel mamalia.
• Transformasi menghasilkan perubahan yang diwariskan, pada gen, sedangkan transfeksi dapat menghasilkan ekspresi sementara atau perubahan permanen pada gen.
