Perbedaan Kunci – Transforman vs Rekombinan
Rekombinasi dan transformasi adalah dua langkah penting dalam rekayasa genetika, di mana karakteristik suatu organisme sengaja dimodifikasi dengan memanipulasi materi genetiknya. Rekombinasi adalah proses di mana DNA asing dimasukkan ke dalam genom vektor dan molekul DNA rekombinan terbentuk. Transformasi adalah langkah berikutnya di mana molekul rekombinan dimasukkan ke dalam organisme inang. Sel inang atau organisme memfasilitasi ekspresi molekul rekombinan. Perbedaan utama antara transforman dan rekombinan adalah bahwa transforman adalah sel atau organisme yang mengambil molekul rekombinan di dalam dan memfasilitasi ekspresi sementara rekombinan adalah vektor yang memungkinkan penyisipan DNA asing ke dalam genomnya dan mengangkut ke transformasi inang untuk ekspresi.
Apa itu Transforman?
Transforman adalah sel atau organisme di mana DNA rekombinan diambil untuk ekspresi. Bakteri umumnya digunakan sebagai organisme inang dalam rekayasa genetika karena mereka mudah tumbuh, berkembang biak dan menangani di bawah kondisi laboratorium dan proses transformasi mudah dibandingkan dengan organisme lain. Bakteri inang yang paling populer digunakan dalam rekayasa genetika adalah bakteri E coli.
Selama proses transformasi, sel inang diinduksi untuk mengambil rekombinan. Namun, beberapa sel inang tidak mengambil molekul rekombinan. Mereka dikenal sebagai nontransformant dan sel-sel yang mengandung molekul DNA rekombinan di dalamnya dikenal sebagai transforman. Seleksi transforman dari nontransforman dilakukan dengan menggunakan penanda terpilih dalam biologi molekuler. Marker yang dapat dipilih disisipkan ke dalam genom vektor bersama dengan sisipan DNA. Penanda terpilih yang umum digunakan adalah gen yang resisten terhadap antibiotik. Gen penanda memfasilitasi diferensiasi transforman dan melanjutkan proses. Setelah proses transformasi, bakteri ditumbuhkan dalam media yang mengandung antibiotik. Hanya transforman yang mampu tumbuh pada media tersebut karena mereka memiliki rekombinan di dalamnya.
Setelah molekul DNA rekombinan diubah di dalam organisme inang, DNA asing dapat diintegrasikan ke dalam genom sel inang atau tetap tidak terintegrasi dalam sitoplasma. Namun, ekspresi dan replikasi DNA asing terjadi pada organisme inang dan menghasilkan hasil yang diinginkan dari proses tersebut.
Apa itu Rekombinan?
Rekombinan adalah organisme atau sel yang memiliki genom rekombinasi yang mengandung DNA asing. Rekombinan adalah hasil dari proses rekayasa genetika. Mereka secara artifisial dibangun in vitro dengan memasukkan gen yang menarik dan memodifikasi genom. Seringkali plasmid bakteri dan bakteriofag bertindak sebagai rekombinan dalam rekayasa genetika. Ia memiliki chimera dari DNA yang berbeda. Molekul DNA rekombinan membawa DNA asing ke organisme inang dan membuatnya mengekspresikan dan membentuk produk yang diinginkan.
Molekul rekombinan dibangun menggunakan endonuklease restriksi dan ligase DNA. Fragmen DNA yang diinginkan dipisahkan dari organisme asli dan dimasukkan ke dalam vektor untuk membuat rekombinan untuk transformasi. Pemotongan gen yang diinginkan dan pembukaan organisme vektor harus dilakukan dengan menggunakan enzim restriksi yang sama untuk membuat ujung lengket yang kompatibel untuk menyatukannya. Setelah DNA asing dimasukkan ke dalam genom vektor, itu dikenal sebagai molekul DNA rekombinan atau rekombinan.
Gambar 02: DNA rekombinan
Apa perbedaan antara Transforman dan Rekombinan?
Transforman vs Rekombinan |
|
Transforman adalah sel yang memiliki molekul DNA rekombinan di dalamnya. | Rekombinan adalah molekul pembawa yang memiliki DNA asing yang disisipkan ke dalam genomnya sendiri. |
Ekspresi DNA Asing | |
Mereka adalah sel inang yang mampu mengekspresikan DNA rekombinan. | Mereka harus dapat menggandakan diri di dalam organisme inang. |
Seleksi | |
Sel yang mudah tumbuh dan berkembang biak dipilih sebagai sel inang. | Mereka harus mudah diekstrak dan harus berisi penanda yang dapat dipilih. |
Ringkasan – Transforman vs Rekombinan
Transforman adalah sel atau organisme dengan molekul DNA rekombinan di dalamnya. Rekombinan adalah organisme atau sel yang telah mengalami rekombinasi genetik dan memiliki DNA asing di dalam genomnya. Sel bakteri sering digunakan sebagai sel inang untuk transformasi dan plasmid dan bakteriofag sering digunakan sebagai vektor dalam teknologi DNA rekombinan. Inilah perbedaan antara transforman dan rekombinan.