Perbedaan utama antara imunopresipitasi dan koimunopresipitasi adalah bahwa imunopresipitasi adalah teknik yang mengendapkan protein dari larutan menggunakan antibodi spesifik, sedangkan koimunopresipitasi adalah teknik yang mengendapkan kompleks protein utuh dari larutan menggunakan antibodi spesifik.
Interaksi antigen-antibodi adalah interaksi kimia spesifik antara antibodi yang diproduksi oleh sel B dan antigen (protein) selama reaksi imun. Biasanya, antigen terlarut bergabung dengan antibodi terlarut dengan adanya elektrolit pada suhu dan pH terlarut untuk membuat kompleks yang terlihat tidak larut. Ini disebut reaksi presipitasi. Oleh karena itu, imunopresipitasi dan koimunopresipitasi adalah dua jenis reaksi pengendapan yang secara rutin digunakan di laboratorium untuk mengidentifikasi protein seperti antigen.
Apa itu Imunopresipitasi?
Imunopresipitasi adalah teknik pengendapan protein dari larutan menggunakan antibodi spesifik. Kadang-kadang, teknik ini juga dikenal sebagai imunopresipitasi protein individu. Imunopresipitasi menggunakan antibodi untuk mengisolasi protein tertentu yang diinginkan dari lisat sel. Antibodi memurnikan protein atau antigen target spesifiknya dari suatu campuran. Antibodi mengikat protein, dan kompleks antibodi-antigen ditarik keluar dari sampel. Dalam pengaturan eksperimental, kompleks antigen-antibodi ditarik keluar menggunakan protein A/G yang digabungkan agarosa atau manik-manik magnetik. Kemudian, manik-manik dicuci, dan protein yang diinginkan dielusi. Protein atau antigen yang dimurnikan yang diperoleh dengan imunopresipitasi diverifikasi dengan berbagai teknik seperti enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) dan western blot (WB).
Gambar 01: Imunopresipitasi
Selanjutnya, protein atau antigen yang diisolasi dapat dikuantifikasi dan diidentifikasi melalui spektrometri massa dengan menggunakan pola pencernaan enzimatik berdasarkan urutan primer. Ada beberapa pertimbangan sebelum memulai eksperimen imunopresipitasi: pemilihan format metode, pengikatan protein dan manik-manik, pemilihan antibodi primer dan isotipe yang tepat, dan kontrol negatif.
Apa itu Koimmunopresipitasi?
Coimmunopresipitasi adalah teknik pengendapan kompleks protein utuh dari larutan menggunakan antibodi spesifik. Koimunopresipitasi umumnya bekerja dengan memilih antibodi spesifik yang menargetkan protein yang diketahui (antigen) yang diyakini sebagai anggota kompleks protein yang lebih besar. Dengan menargetkan anggota yang diketahui dengan antibodi spesifik, adalah mungkin untuk menarik seluruh kompleks protein keluar dari larutan. Ini memungkinkan identifikasi anggota kompleks yang tidak diketahui. Konsep menarik kompleks protein keluar dari larutan kadang-kadang disebut sebagai mekanisme “pull-down”.
Gambar 02: B Coimmunoprecipitation
Coimmunoprecipitation adalah teknik ampuh yang digunakan untuk menganalisis interaksi protein-protein. Tujuan utama koimmunopresipitasi adalah identifikasi mitra yang berinteraksi seperti ligan, kofaktor, atau molekul pemberi sinyal ke protein yang diinginkan. Selain itu, koimmunopresipitasi adalah teknik efektif yang digunakan untuk memisahkan protein dari serum, lisat sel, jaringan homogen, atau media yang dikondisikan.
Apa Persamaan Antara Imunopresipitasi dan Koimunopresipitasi?
- Imunopresipitasi dan koimunopresipitasi adalah dua jenis teknik berbasis reaksi pengendapan.
- Kedua teknik dapat digunakan untuk mengidentifikasi antigen target melalui antibodi spesifik.
- Kedua teknik sangat bergantung pada interaksi antigen-antibodi.
- Mereka secara rutin digunakan di laboratorium klinis.
Apa Perbedaan Antara Imunopresipitasi dan Koimunopresipitasi?
Imunopresipitasi adalah teknik yang mengendapkan protein dari larutan menggunakan antibodi spesifik, sedangkan koimunopresipitasi adalah teknik yang mengendapkan kompleks protein utuh dari larutan menggunakan antibodi spesifik. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara imunopresipitasi dan koimmunopresipitasi. Selanjutnya, imunopresipitasi lebih umum digunakan di laboratorium, sedangkan koimunopresipitasi tidak umum digunakan di laboratorium.
Infografik di bawah ini menyajikan perbedaan antara imunopresipitasi dan koimmunopresipitasi dalam bentuk tabel untuk perbandingan berdampingan.
Ringkasan – Imunopresipitasi vs Koimunopresipitasi
Imunopresipitasi dan koimunopresipitasi adalah dua jenis teknik berbasis reaksi pengendapan yang bergantung pada interaksi antigen-antibodi. Teknik imunopresipitasi mengendapkan protein keluar dari larutan menggunakan antibodi spesifik, sedangkan teknik koimmunopresipitasi mengendapkan kompleks protein utuh dari larutan menggunakan antibodi spesifik. Jadi, ini merangkum perbedaan antara imunopresipitasi dan koimmunopresipitasi.
