Perbedaan utama antara RIA dan ELISA adalah radioimmunoassay (RIA) adalah teknik immunoassay yang menggunakan radioisotop untuk mendeteksi kompleks antigen-antibodi, sedangkan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) adalah teknik immunoassay yang menggunakan enzim untuk mendeteksi antigen -kompleks antibodi.
Deteksi protein spesifik seperti antigen sangat penting dalam diagnosis penyakit. Oleh karena itu, RIA dan ELISA adalah dua teknik immunoassay yang digunakan di laboratorium untuk mendeteksi protein spesifik secara cepat, terutama antigen. Umumnya, antibodi spesifik mengikat antigen target dan membentuk kompleks yang terlihat yang dikenal sebagai presipitin. Kompleks antibodi dan antigen ini dapat diidentifikasi melalui teknik yang berbeda. Teknik deteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop disebut RIA, dan teknik deteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim disebut ELISA.
Apa itu RIA?
Radioimmunoassay (RIA) adalah teknik immunoassay yang mendeteksi kompleks antigen dan antibodi menggunakan radioisotop. Rosalyn Sussman Yalow mengembangkan teknik ini pada tahun 1960 dengan bantuan Solomon Berson. Untuk penemuan luar biasa ini, Rosalyn Sussman Yalow memenangkan Hadiah Nobel untuk kedokteran pada tahun 1977. Biasanya, dalam radioimmunoassay, sejumlah antigen yang diketahui pertama kali dibuat radioaktif Teknik ini sering menggunakan isotop radioaktif gamma yodium, yang disebut 125-I, untuk memberi label antigen. Radioisotop ini biasanya menempel pada asam amino tirosin antigen. Kemudian antigen radiolabeled dicampur dengan antibodi. Akibatnya, antigen dan antibodi berlabel radio secara khusus mengikat satu sama lain.
Kemudian, sampel serum yang mengandung jumlah yang tidak diketahui dari antigen yang sama ditambahkan. Hal ini menyebabkan antigen yang tidak berlabel dari serum bersaing dengan antigen berlabel untuk tempat pengikatan antibodi. Ketika konsentrasi antigen yang tidak berlabel meningkat, lebih banyak yang mengikat antibodi, menggantikan varian yang berlabel radio. Dengan demikian, ini mengurangi rasio antigen radiolabelled yang terikat antibodi dengan antigen radiolabelled bebas. Pada akhir prosedur, antigen yang terikat dipisahkan. Pada akhirnya, radioaktivitas antigen bebas dalam supernatan yang tersisa diukur menggunakan pencacah gamma.
Apa itu ELISA?
ELISA adalah teknik immunoassay yang mendeteksi kompleks antigen dan antibodi dengan menggunakan enzim. Ini adalah uji analitik biokimia yang pertama kali dijelaskan oleh Engvall dan Perlmann pada tahun 1971. Dalam bentuk paling sederhana dari teknik ELISA, antigen dari sampel pasien dilekatkan pada permukaan padat. Kemudian antibodi yang cocok diterapkan di atas permukaan, sehingga dapat mengikat antigen.
Gambar 01: ELISA
Antibodi khusus ini terkait dengan enzim. Kemudian, antibodi yang tidak terikat dihilangkan dengan mencuci dengan deterjen. Pada langkah terakhir dari teknik ini, substrat enzim ditambahkan. Jika ada pengikatan antigen dan antibodi yang tepat, reaksi selanjutnya menghasilkan sinyal warna yang dapat dideteksi, paling sering perubahan warna.
Apa Persamaan RIA dan ELISA?
- RIA dan ELISA adalah teknik immunoassay.
- Kedua teknik memiliki pembentukan kompleks antigen dan antibodi.
- Teknik ini dapat digunakan untuk mendeteksi protein yang tidak diketahui dalam sampel.
- Keduanya digunakan dalam diagnosis penyakit di laboratorium.
- Keduanya adalah teknik yang sangat spesifik dan sensitif.
Apa Perbedaan RIA dan ELISA?
RIA adalah teknik immunoassay untuk mendeteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop. ELISA adalah teknik immunoassay untuk mendeteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim. Jadi, inilah perbedaan utama antara RIA dan ELISA. Selain itu, dalam teknik RIA, antigen diberi label, tetapi dalam ELISA, antibodi diberi label. Selanjutnya, dalam teknik RIA, molekul pelabelan adalah radioisotop, sedangkan pada ELISA, molekul pelabelan adalah enzim. Jadi, inilah perbedaan lain antara RIA dan ELISA.
Infografik di bawah ini menunjukkan lebih banyak perbedaan antara RIA dan ELISA dalam bentuk tabel.
Ringkasan – RIA vs ELISA
Immunoassays memainkan peran yang sangat penting dalam berbagai pengaturan bioanalitik, seperti diagnostik klinis, analisis biofarmasi, pemantauan lingkungan, biosekuriti, dan pengujian makanan. Sejak tahun 1960-an, berbagai macam immunoassay telah dikembangkan. RIA dan ELISA keduanya merupakan teknik immunoassay. RIA adalah teknik immunoassay untuk mendeteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan radioisotop. ELISA adalah teknik immunoassay untuk mendeteksi kompleks antigen-antibodi dengan menggunakan enzim. Demikian ringkasan perbedaan RIA dan ELISA.
