Perbedaan utama antara elusi isokratik dan gradien adalah bahwa elusi isokratik mengacu pada mempertahankan konsentrasi konstan dalam fase gerak, sedangkan elusi gradien mengacu pada mempertahankan konsentrasi yang bervariasi dalam fase gerak.
Istilah isokratik dan elusi gradien digunakan dalam kromatografi. Selama menjalankan kromatografi, kami menggunakan fase diam, yang merupakan zat yang tidak bergerak, bersama dengan fase gerak, zat yang bergerak. Elusi isokratik dan gradien menggambarkan sifat-sifat fase gerak.
Apa itu Elusi Isokratik?
Elusi isokratik adalah istilah yang digunakan dalam kromatografi ketika fase gerak memiliki konsentrasi konstan. Di sini, konsentrasi fase gerak konstan selama proses kromatografi. Dalam proses ini, kita dapat mengamati peningkatan lebar puncak dengan waktu retensi secara linier dalam kromatogram. Namun, hal ini menyebabkan kerugian – puncak elusi akhir untuk elusi akhir menjadi sangat datar dan lebar. Oleh karena itu, puncak yang lebar ini menjadi sulit untuk dikenali sebagai puncak.
Selain itu, dalam elusi isokratik, selektivitas tidak berubah sesuai dengan dimensi kolom. Ini berarti selektivitas tidak tergantung pada perubahan dimensi kolom. Di sini, panjang dan diameter dianggap sebagai dimensi kolom. Oleh karena itu, puncak terelusi dalam urutan yang sama.
Apa itu Elusi Gradien?
Elusi gradien adalah istilah yang digunakan dalam kromatografi ketika fase gerak memiliki konsentrasi yang bervariasi. Dengan kata lain, konsentrasi fase gerak tidak harus tetap konstan. Misalnya, dalam HPLC, metode pemisahan yang umum menggunakan metanol 10% awalnya dan berakhir pada 90%, dengan meningkatkan konsentrasi secara bertahap. Fase gerak memiliki dua komponen: pelarut lemah dan pelarut kuat. Pelarut yang lemah memungkinkan zat terlarut terelusi secara perlahan sedangkan pelarut yang kuat menyebabkan elusi yang cepat dari zat terlarut. Dalam kromatografi fase terbalik, kami menggunakan air sebagai pelarut lemah dan pelarut organik sebagai pelarut kuat.
Gambar 01: HPLC
Selain itu, metode elusi gradien menurunkan komponen yang dielusi selanjutnya untuk membuatnya terelusi lebih cepat, memberikan puncak yang sempit pada kromatogram. Metode ini meningkatkan bentuk puncak dan tinggi puncak juga. Selanjutnya, pada teknik elusi gradien, urutan elusi berubah dengan perubahan dimensi kolom.
Apa Perbedaan Antara Elusi Isokratik dan Gradien?
Istilah isokratik dan elusi gradien digunakan dalam kromatografi. Elusi isokratik dan gradien menggambarkan sifat-sifat fase gerak. Perbedaan utama antara elusi isokratik dan gradien adalah bahwa elusi isokratik mengacu pada pemeliharaan konsentrasi konstan dalam fase gerak sedangkan elusi gradien mengacu pada pemeliharaan konsentrasi yang bervariasi dalam fase gerak.
Dalam teknik elusi isokratik, lebar puncak meningkat dengan waktu retensi secara linier. Namun, pada teknik elusi gradien, retensi komponen-komponen yang dielusi selanjutnya berkurang, sehingga elusi menjadi lebih cepat dan memberikan puncak-puncak yang sempit. Selain itu, pada elusi isokratik, selektivitas tidak bergantung pada dimensi kolom, tetapi pada elusi gradien, selektivitas berubah seiring dengan perubahan dimensi kolom.
Tabel berikut merangkum perbedaan antara elusi isokratik dan gradien.
Ringkasan – Elusi Isokratik vs Gradien
Elusi isokratik dan elusi gradien menggambarkan sifat-sifat fase gerak. Perbedaan utama antara elusi isokratik dan gradien adalah bahwa elusi isokratik mengacu pada pemeliharaan konsentrasi konstan dalam fase gerak sedangkan elusi gradien mengacu pada pemeliharaan konsentrasi yang bervariasi dalam fase gerak.
