Perbedaan utama antara HPLC dan HPLC cepat adalah bahwa tekanan pompa yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa sedangkan tekanan pompa untuk HPLC cepat adalah sekitar 3-5 MPa.
Teknik paling umum yang kami gunakan untuk memisahkan komponen campuran adalah “kromatografi cair”. Ada beberapa teknik untuk mencapai tujuan ini di mana HPLC sangat populer. HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography yang mengidentifikasi, mengukur, dan memisahkan komponen campuran cairan dengan cepat dan efisien. HPLC cepat adalah aplikasi khusus HPLC yang akhir-akhir ini menarik perhatian mereka yang terlibat dalam studi solusi.
Apa itu HPLC?
HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. Itu menggunakan tekanan tinggi untuk mendorong pelarut sehingga mereka melewati kolom. Juga, ini adalah cara yang ideal untuk memisahkan dan mempelajari berbagai senyawa seperti asam amino, asam nukleat, karbohidrat, steroid, antibiotik dan hidrokarbon. HPLC memiliki banyak keunggulan dibandingkan metode pemisahan campuran lainnya seperti resolusi yang lebih tinggi dan analisis yang lebih cepat. Ini menghilangkan kebutuhan untuk pengemasan ulang dan regenerasi dan menawarkan kontrol yang lebih baik atas parameter dan dengan demikian, meningkatkan efisiensi pemisahan. Idealnya, HPLC cocok untuk aplikasi skala besar karena dapat memisahkan partikel yang sangat kecil dan memungkinkan penggunaan tekanan tinggi yang memudahkan pelarut mengalir dengan mudah.
Gambar 01: Kolom HPLC
Secara ringkas cara kerja teknik HPLC adalah sebagai berikut. Pertama, kita harus memasukkan sampel ke dalam aliran fase gerak dalam jumlah kecil yang terpisah menggunakan pompa. Tekanan pompa harus dipertahankan pada 40 MPa. Aliran fase gerak ini meresap melalui kolom HPLC. Kemudian, komponen dalam sampel juga melewati kolom. Namun, kecepatan gerakannya berbeda satu sama lain karena perbedaan interaksi antara komponen sampel dan adsorben di dalam kolom. Kami menyebut adsorben ini sebagai fase diam karena berada di dalam kolom (tidak bergerak). Kemudian, di akhir kolom, kita dapat mengumpulkan sampel yang terelusi dari kolom, sehingga kita dapat mengumpulkan komponen dalam sampel secara terpisah.
Apa itu HPLC Cepat?
Baru-baru ini, ilmuwan penelitian di lembaga penelitian Schering Plough mengembangkan teknik HPLC cepat yang merupakan versi lanjutan dari HPLC karena memungkinkan pemisahan senyawa dari campuran lebih cepat. Juga, dikenal sebagai HPLC cepat, teknik ini memanfaatkan partikel silika inti leburan 2,7um yang dibuat dengan menggabungkan silika berpori 0,5um di atas partikel silika padat. Partikel yang dibuat secara unik ini membuat prosedur pemisahan menjadi sangat cepat dan juga pada tekanan balik yang rendah daripada yang kami gunakan di HPLC.
Gambar 02: Aparat FPLC
HPLC Cepat mendapatkan hasil yang sebanding dengan UPLC, tetapi para ilmuwan menganggap bahwa teknik ini lebih unggul karena tidak memerlukan peralatan bertekanan sangat tinggi yang sangat mahal. Hebatnya, HPLC cepat tidak memerlukan protokol laboratorium baru.
Apa Perbedaan HPLC dan HPLC Cepat?
HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi dan HPLC cepat adalah bentuk lanjutan dari kromatografi cair kinerja tinggi. Perbedaan utama antara HPLC dan HPLC cepat adalah bahwa tekanan pompa yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa. Sedangkan tekanan pompa untuk HPLC cepat sekitar 3-5 MPa. Selanjutnya, kita dapat memisahkan senyawa yang berbeda seperti asam amino, asam nukleat, karbohidrat, steroid, antibiotik dan hidrokarbon menggunakan teknik HPLC sedangkan teknik HPLC cepat terutama digunakan untuk pemisahan protein.
Infografik di bawah ini menyajikan informasi lebih lanjut tentang perbedaan antara HPLC dan HPLC cepat.
Ringkasan – HPLC vs HPLC Cepat
HPLC adalah teknik kromatografi cair yang telah menjadi sangat populer di seluruh dunia. Fast HPLC adalah versi baru dari HPLC, ilmuwan penelitian di Schering Plough Institute mengembangkan teknik baru ini. Perbedaan utama antara HPLC dan HPLC cepat terletak pada tekanan pompa yang kami gunakan untuk pemisahan. Itu adalah; tekanan pompa yang kami gunakan untuk HPLC adalah sekitar 40 MPa. Tapi, tekanan pompa untuk HPLC cepat sekitar 3-5 MPa.
