Perbedaan Kunci – Imunositokimia vs Imunohistokimia
Immunocytochemistry (ICC) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam diagnostik molekuler, yang mengidentifikasi dan mengkonfirmasi terjadinya penyakit tidak menular dan penyakit menular berdasarkan penanda molekuler yang ada pada sel. Perbedaan utama imunositokimia dan imunohistokimia adalah molekul yang digunakan sebagai prosedur analisis dalam teknik ini. Dalam ICC, antibodi primer dan sekunder yang terkonjugasi dengan penanda seperti fluoresensi digunakan sedangkan antibodi IHC, monoklonal dan poliklonal digunakan untuk penentuan diagnostik.
Apa itu Immunocytochemistry (ICC)?
ICC menggunakan antibodi primer dan sekunder yang terikat pada penanda seperti penanda fluoresen atau enzim dan merupakan metode deteksi yang kuat untuk mendeteksi antigen yang ada pada sel target yang dapat berupa partikel seluler menular atau sel tumor kanker. Tiga jenis kontrol diperlukan untuk imunositokimia.
- Antibodi Primer – kontrol yang menunjukkan spesifisitas antibodi primer yang mengikat antigen
- Antibodi Sekunder – kontrol yang menunjukkan bahwa label spesifik untuk antibodi primer
- Label Controls – menunjukkan bahwa pelabelan adalah hasil dari label yang ditambahkan dan bukan hasil dari pelabelan endogen.
Gambar 01: Imunositokimia memberi label protein individu di dalam sel (di sini, Tirosin hidroksilase di akson neuron otonom simpatik ditunjukkan dengan warna hijau).
Kontrol antibodi primer bersifat spesifik untuk setiap antibodi baru dan tidak dapat diulang untuk setiap eksperimen. Kontrol antibodi sekunder dirancang berdasarkan antibodi primer yang digunakan dalam percobaan dan disertakan dengan setiap percobaan. Kontrol pelabelan disertakan jika kondisi prosedur diubah, sampel diubah, atau ketika pelabelan yang tidak terduga ditemukan.
Dua aplikasi utama ICC adalah Radio Immuno – Assay (RIA) dan Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Antibodi yang paling umum digunakan adalah imunoglobulin G.
Apa itu Imunohistokimia (IHC)?
Dalam Imunohistokimia, sampel sumber mengandung antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan keberadaan antigen dalam sel asing. Teknik ini didasarkan pada reaksi spesifik pengikatan antigen-antibodi. Antibodi yang digunakan dalam deteksi dapat ditandai dengan penanda yang berbeda; mereka bisa menjadi penanda fluoresensi, penanda radiolabeled atau penanda kimia. Melalui memfasilitasi pengikatan in vitro antara antigen dan antibodi yang ditargetkan, ada atau tidak adanya protein tertentu dari sel dapat ditentukan.
Gambar 02: Pewarnaan imunohistokimia ginjal normal dengan CD10
Saat ini, para ilmuwan terlibat dalam pengembangan antibodi target untuk antigen spesifik yang ada dalam sel yang dapat berkembang sebagai sel tumor ganas atau antigen yang ada dalam agen infeksi seperti HIV.
Apa Persamaan Antara Imunositokimia dan Imunohistokimia?
- Reaksi sangat spesifik dan akurat di ICC dan IHC.
- Penerapan ICC dan IHC mencakup diagnosis kanker dan penyakit menular.
- Kondisi steril harus dipertahankan pada kedua kondisi, dan keduanya harus dilakukan secara in vitro
- Kedua teknik memberikan hasil yang dapat direproduksi.
- Keduanya cepat.
- Pelabelan radio, teknik fluoresensi digunakan sebagai metode deteksi di ICC dan IHC.
- Keduanya didasarkan pada pasangan antigen-antibodi.
Apa Perbedaan Antara Imunositokimia dan Imunohistokimia?
Imunositokimia (ICC) vs Imunohistokimia (IHC) |
|
| ICC menggunakan penanda terikat antibodi primer dan sekunder seperti penanda fluoresen atau enzim dan merupakan metode deteksi yang kuat untuk mendeteksi antigen yang ada pada sel target. | IHC adalah metode yang menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan keberadaan antigen yang merupakan penanda protein khusus yang ditempatkan pada permukaan sel. |
| Sumber Contoh | |
| Sampel yang berasal dari jaringan yang telah diproses secara histologis menjadi irisan tipis digunakan dalam ICC. | IHC menggunakan sampel yang terdiri dari sel yang tumbuh dalam lapisan tunggal atau sel dalam suspensi yang disimpan pada slide. |
| Pemrosesan Sampel | |
| Dalam ICC, sel harus permeabel untuk memfasilitasi penetrasi antibodi ke target intraseluler. | Dalam IHC, sel difiksasi formalin, dibenamkan parafin sebelum diwarnai. |
Ringkasan – Imunositokimia vs Imunohistokimia
Diagnostik molekuler digunakan untuk mengidentifikasi dan mengkonfirmasi terjadinya penyakit tidak menular dan penyakit menular berdasarkan penanda molekuler yang ada pada sel. Penanda molekuler dapat berupa protein atau sekuens DNA atau RNA; perkembangan teknologi seperti ICC dan IHC telah membuka jalan bagi para ilmuwan untuk mengidentifikasi penyakit dan penyebabnya pada tahap awal. Baik ICC dan IHC tergantung pada reaksi spesifik antara antibodi dan antigen meskipun sumber sampelnya. Perbedaan utama antara imunositokimia dan imunohistokimia adalah pemrosesan sampel dari kedua prosedur tersebut.
Download Versi PDF Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Imunositokimia dan Imunohistokimia.
