Perbedaan Kunci – Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia
Diagnosis kanker dan penyakit menular adalah tren populer di mana teknik berbasis proteomik dan genomik baru digunakan untuk tujuan mengidentifikasi tumor atau sel infeksi, proliferasinya dan tempat perkembangan sel serta menganalisis dasar genetik dari sebagian besar penyakit menular dan menular. penyakit tidak menular. Ini akan menghasilkan pemrosesan dan perancangan obat yang akurat dan dalam mengembangkan terapi yang disesuaikan untuk penyakit. Hibridisasi in situ (ISH) dan Imunohistokimia (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam biologi kanker dan perbedaan utama antara hibridisasi in situ dan imunokimia terletak pada molekul yang digunakan dalam prosedur analisis. Pada ISH, probe asam nukleat digunakan dalam analisis sedangkan pada IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk penentuan diagnostik.
Apa itu Hibridisasi In Situ (ISH)?
Hibridisasi in situ adalah teknik hibridisasi asam nukleat yang dilakukan secara langsung pada sebagian atau bagian jaringan, di seluruh jaringan atau di dalam sel. Teknik ini bergantung pada teori pasangan basa komplementer Watson Crick, yang menghasilkan hibrid DNA-DNA atau hibrid DNA-RNA yang dapat mendeteksi gen yang bermutasi atau mengidentifikasi gen yang diinginkan. Sekuens DNA beruntai tunggal, sekuens DNA beruntai ganda, sekuens RNA beruntai tunggal atau sekuens oligonukleotida sintetis digunakan sebagai probe selama teknik hibridisasi, dan probe ini diberi label dengan fosfor radioaktif pada ujung 5' untuk prosedur identifikasi pada autoradiografi atau diberi label menggunakan pewarna fluoresen. Ada berbagai jenis teknik ISH yang tersedia berdasarkan jenis probe yang digunakan dan jenis teknik visualisasi yang diikuti.
Gambar 01: Hibridisasi Fluorescent In Situ
Ada banyak aplikasi ISH, terutama dalam diagnostik molekuler penyakit menular untuk mengidentifikasi keberadaan patogen dan mengkonfirmasi patogen melalui diagnostik molekuler. Ini juga digunakan dalam bidang biologi perkembangan, kariotipe dan analisis filogenetik dan pemetaan fisik kromosom.
Apa itu Imunohistokimia (IHC)?
Dalam teknik IHC, molekul utama yang dianalisis adalah antigen. Selama IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan keberadaan antigen pada infeksi atau status proliferasi sel ganas. Teknik ini didasarkan pada pengikatan antigen-antibodi, dan label enzim digunakan untuk teknik ini; salah satu aplikasi tersebut adalah ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Penanda juga dapat berupa antibodi bertanda fluoresen atau antibodi berlabel radio.
Gambar 02: Imunohistokimia
IHC banyak digunakan untuk deteksi sel kanker. Prosedur diagnostik menargetkan antigen yang ada pada sel tumor untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi tumor. Prosedur yang sama digunakan untuk mendiagnosis agen infeksi. Antibodi monoklonal dan poliklonal juga digunakan untuk menganalisis produk gen yang berbeda dengan mengaktifkan reaksi pengikatan antibodi-antigen antara protein yang diinginkan dan antibodi sintetik yang diberikan.
Apa Persamaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?
- ISH dan IHC adalah reaksi yang sangat spesifik.
- Kedua teknik ini sangat akurat.
- Kedua teknik tersebut dapat digunakan dalam diagnosis kanker dan penyakit menular.
- Teknik ini dilakukan di lingkungan in-vitro yang steril.
- Keduanya adalah teknik cepat yang memberikan hasil yang dapat direproduksi.
- ISH dan IHC menggunakan metode deteksi seperti pelabelan radio, dan teknik fluoresensi.
Apa Perbedaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?
Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia |
|
| ISH adalah teknik hibridisasi asam nukleat yang dilakukan secara langsung pada sebagian atau bagian jaringan atau seluruh jaringan. | IHC adalah teknik di mana antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan keberadaan antigen, yang merupakan penanda protein khusus yang ditempatkan pada permukaan sel. |
| Jenis Bio Molekul yang Dianalisa | |
| ISH menganalisis asam nukleat. | IHC menganalisis protein-antigen. |
| Dasar Reaksi Biokimia | |
| Pepasangan basa komplementer antara DNA-DNA atau DNA-RNA terjadi pada teknik ini. | Interaksi antigen-antibodi terlibat dalam imunohistokimia. |
| Metode Deteksi Terkait-Enzim | |
| Metode deteksi terkait enzim tidak dapat digunakan di ISH. | Metode deteksi terkait enzim dapat digunakan di IHC. |
Ringkasan – Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia
Diagnostik molekuler adalah metode cepat dan konfirmasi yang dapat digunakan untuk mengidentifikasi penyakit tidak menular seperti kanker atau penyakit menular seperti HIV atau Tuberkulosis berdasarkan penanda molekuler yang ada pada sel yang mengarah pada manifestasi penyakit. Penanda molekuler dapat hadir dalam bentuk protein yang diekspresikan atau pada tingkat genetik berdasarkan teknik baru yang berbeda diperkenalkan untuk meningkatkan efisiensi dan kurang melelahkan, meskipun ada biaya tinggi yang terlibat dengan teknik ini. Jadi ISH bergantung pada pembentukan hibrid DNA-DNA atau DNA-RNA, dan IHC bergantung pada reaksi spesifik antara antibodi dan antigen. Inilah perbedaan antara hibridisasi in situ.
Unduh Versi PDF Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia.
