Perbedaan utama antara BL21 dan DH5 Alpha adalah bahwa BL21 adalah sel E. coli kompeten rekayasa genetika kekurangan protease yang digunakan terutama untuk ekspresi protein, sedangkan DH5 Alpha adalah sel E. coli kompeten rekayasa genetika dengan mutasi recA1 yang digunakan terutama untuk transformasi plasmid.
E. E.coli adalah salah satu organisme pilihan yang terkenal untuk produksi protein rekombinan. Ini telah menjadi platform ekspresi paling populer selama bertahun-tahun. Itu juga digunakan sebagai pabrik sel. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua sel E. coli rekayasa genetika yang masing-masing digunakan untuk ekspresi protein dan transformasi plasmid.
Apa itu BL21?
BL21 adalah sel E.coli kompeten yang direkayasa secara genetik kekurangan protease yang terutama digunakan untuk ekspresi protein. E. coli BL21 adalah sel bakteri yang berasal dari strain B. Ini memiliki cacat protease Lon dan protease membran luar ompT. Ini biasanya digunakan untuk ekspresi protein rekombinan karena biasanya membawa stabilitas pada protein yang diekspresikan. BL21 berguna untuk ekspresi protein dengan pCold I-IV DNA dan pCold TF DNA. Tetapi sel E. coli yang kompeten ini tidak dimaksudkan untuk sistem ekspresi protein menggunakan promotor T7 seperti sistem pET. Alasan di balik ini adalah BL21 tidak mengekspresikan T7 RNA polimerase. Selain itu, tidak direkomendasikan untuk digunakan untuk konstruksi atau preparasi plasmid karena tidak memiliki mutasi recA.
Gambar 01: BL21
BL21 pertama kali dijelaskan oleh Studier pada tahun 1986 setelah berbagai modifikasi garis B. Sel BL21 kekurangan protease LON, yang mendegradasi banyak protein asing. Selain itu, tidak ada gen lain yang mengkode protease membran luar (OmpT) yang berfungsi untuk mendegradasi protein ekstraseluler. Kekurangan protein ini memicu keberhasilan produksi protein asing dalam sel E. coli BL21. Selanjutnya, mutasi hsdSB pada sel-sel ini mencegah metilasi DNA asing dan gangguan pada sel BL21.
Apa itu DH5 Alpha?
DH5 Alpha adalah sel E. coli kompeten yang direkayasa secara genetik dengan mutasi recA1 yang terutama digunakan untuk transformasi plasmid. Sel DH5 Alpha E. coli direkayasa secara genetik oleh ahli biologi Amerika Douglas Hanahan untuk memaksimalkan efisiensi transformasi. Sel alfa DH5 memiliki tiga mutasi yang berbeda: recA1, endA1, dan lacZΔM15. recA1 adalah mutasi titik tunggal yang menggantikan glisin 160 dengan dan residu asam aspartat dalam polipeptida recA. Mutasi ini menonaktifkan aktivitas rekombinasi dan menonaktifkan rekombinasi homolog. mutasi endA1 menonaktifkan endonuklease intraseluler yang mencegahnya mendegradasi plasmid yang dimasukkan.
Gambar 02: DH5 Alpha
Selain itu, mutasi lacZΔM15 memungkinkan penyaringan sel-sel yang diubah menjadi biru-putih. Sel-sel ini adalah sel yang kompeten. Mereka sering digunakan dengan transformasi kalsium klorida untuk memasukkan plasmid yang diinginkan. Penelitian terbaru diidentifikasi bahwa sel Alpha DH5 dengan metode Hanahan adalah sel kompeten yang paling efisien untuk transformasi plasmid.
Apa Persamaan Antara BL21 dan DH5 Alpha?
- BL21 dan DH5 Alpha adalah dua E.coli hasil rekayasa genetika
- Keduanya adalah sel yang kompeten.
- Mereka terdiri dari mutasi yang berbeda.
- Keduanya tidak memiliki habitat alami.
- Ini digunakan untuk keperluan laboratorium seperti studi ekspresi dan prosedur kloning.
Apa Perbedaan Alpha BL21 dan DH5?
BL21 adalah sel E. coli kompeten rekayasa genetika yang kekurangan protease terutama digunakan untuk ekspresi protein. Di sisi lain, DH5 Alpha adalah sel E. coli kompeten yang direkayasa secara genetik dengan mutasi recA1 yang terutama digunakan untuk transformasi plasmid. Jadi, inilah perbedaan utama antara BL21 dan DH5 Alpha. Selanjutnya sel E.coli BL21 tidak mengalami mutasi recA1, sedangkan sel DH5 Alpha E.coli mengalami mutasi recA1.
Infografik berikut mencantumkan perbedaan antara BL21 dan DH5 Alpha dalam bentuk tabel.
Ringkasan – BL21 vs DH5 Alpha
Strain non-patogen E. coli secara genetik dikembangkan oleh para ilmuwan untuk studi ekspresi laboratorium dan tujuan kloning. BL21 dan DH5 Alpha adalah dua sel E. coli yang direkayasa secara genetik. BL21 terutama digunakan untuk studi ekspresi protein. Di sisi lain, DH5 Alpha terutama digunakan untuk tujuan transformasi plasmid. Demikian ringkasan perbedaan BL21 dan DH5 Alpha.
