Perbedaan utama antara uji bradford dan protein rendah adalah bahwa uji protein Bradford didasarkan pada pergeseran absorbansi pewarna Coomassie briliant blue G-250 sedangkan uji protein Lowry didasarkan pada reaksi ion tembaga (Cu+) dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida dengan pereaksi Folin–Cioc alteu.
Pengujian adalah teknik analisis yang membantu mengkarakterisasi komponen fungsional utama sampel. Oleh karena itu, tes dapat berupa tes kualitatif atau kuantitatif. Banyak bidang termasuk kedokteran laboratorium, farmakologi, biologi lingkungan, biologi molekuler, biokimia, dan imunologi menggunakan jenis tes ini secara rutin. Uji protein Bradford dan Lowry adalah dua uji biokimia yang menentukan konsentrasi protein dalam larutan sampel. Kedua tes menggunakan teknik kolorimetri untuk memberikan hasil.
Apa itu Uji Protein Bradford?
Pengujian protein Bradford adalah prosedur analitis spektroskopi cepat untuk analisis protein. Ini menunjukkan akurasi tinggi saat mengukur konsentrasi protein dalam larutan. Marion Bradford memperkenalkan prosedur ini pada tahun 1976. Dalam pengujian ini, reaksi total didasarkan pada komposisi asam amino dari protein yang diukur. Dalam istilah lain, uji protein Bradford adalah uji kolorimetri. Ini menggunakan pewarna Coomassie biru cemerlang. Oleh karena itu, uji protein kolorimetri ini tergantung pada pergeseran absorbansi pewarna. Coomassie Brilliant Blue G-250 hadir dalam tiga format: kationik (merah), anionik (biru) dan netral (hijau). Selama kondisi asam, bentuk merah dari pewarna akan diubah menjadi biru. Ini menegaskan pengikatan protein. Jika protein tidak ada, larutan mungkin tetap berwarna coklat.
Gambar 01: Uji protein Bradford
Pengujian protein Bradford berbeda dari uji protein lainnya karena kurang rentan terhadap gangguan berbagai senyawa kimia yang ada dalam larutan protein. Senyawa tersebut antara lain natrium, kalium, glukosa, dan sukrosa, dll.
Apa itu Uji Protein Rendah?
Pengujian protein rendah adalah uji biokimia yang digunakan untuk menentukan kadar total protein dalam suatu larutan. Oliver H. Lowry adalah orang yang mengembangkan reagen ini pada tahun 1940. Prosedur ini menggambarkan konsentrasi protein total larutan dengan perubahan warna yang sebanding dengan konsentrasi protein dalam larutan. Oleh karena itu, ini juga merupakan uji protein kolorimetri.
Reaksi antara ion tembaga (Cu+) yang dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida dan reagen Folin–Cioc alteu adalah dasar dari prosedur ini. Juga, reagen ini mengandung asam fosfomolibdat dan asam fosfor-tungstat. Namun, mekanisme reaksi uji protein Lowry tidak dipahami dengan baik. Tetapi melibatkan oksidasi residu sistein, triptofan dan tirosin dengan mereduksi reagen Folin–Cioc alteu.
Gambar 02: Uji protein rendah
Residu sistein berkontribusi pada absorbansi yang diamati pada uji protein Lowry dan reaksi menghasilkan molekul biru cemerlang; heteropoli molibdenum biru. Reduksi molekul ini diukur dengan absorbansi pada 660nm. Oleh karena itu, konsentrasi residu sistein dan triptofan yang mereduksi reagen Folin–Cioc alteu menyimpulkan konsentrasi total protein dalam larutan.
Apa Persamaan Antara Bradford dan Lowry Protein Assay?
- Tes protein Bradford dan Lowry menentukan konsentrasi protein dalam larutan.
- Kedua metode tersebut adalah metode kolorimetri.
- Selain itu, sensitivitas kedua metode tersebut tinggi.
Apa Perbedaan Antara Uji Protein Bradford dan Lowry?
Pengujian protein Bradford dan Lowry adalah dua jenis pengujian yang menentukan konsentrasi protein dalam suatu larutan. Uji protein Bradford bergantung pada pergeseran absorbansi pewarna Coomassie briliant blue G-250 sedangkan uji protein Lowry bergantung pada reaksi ion tembaga yang dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida, dengan reagen Folin-Cioc alteu. Jadi, inilah perbedaan utama antara uji protein Bradford dan Lowry. Uji protein Bradford membutuhkan waktu 15 menit untuk menghasilkan hasil sementara uji protein Lowery membutuhkan waktu 40-60 menit untuk menghasilkan hasil. Jadi, ini adalah perbedaan lain antara uji protein Bradford dan Lowry. Selanjutnya, uji protein Bradford bergantung pada komposisi asam amino sedangkan uji protein Lowry sebagian bergantung pada komposisi asam amino. Oleh karena itu, ini juga merupakan perbedaan antara uji protein Bradford dan Lowry.
Inforaphic di bawah ini memberikan rincian lebih lanjut tentang perbedaan antara uji protein Bradford dan Lowry.
Ringkasan – Bradford vs Lowry Protein Assay
Pengujian adalah teknik analisis yang digunakan untuk mengkarakterisasi komponen fungsional utama sampel. Uji protein Bradford dan Lowry adalah dua jenis uji protein yang berfungsi di bawah teknik kolorimetri. Kedua uji protein Bradford dan Lowry menentukan konsentrasi protein dalam larutan. Namun, perbedaan utama antara Bradford dan Lowry Protein Assay terletak pada teknik kolorimetri yang mereka gunakan. Uji protein Bradford menggunakan Coomassie briliant blue G-250 sedangkan uji protein Lowry menggunakan ion tembaga (Cu+) dan reagen Folin–Cioc alteu. Selanjutnya, metode Bradford memberikan hasil yang lebih cepat daripada uji protein Lowry. Namun, kedua metode tersebut merupakan metode yang sangat sensitif dan dapat mengalami gangguan dari berbagai zat.
