Perbedaan Kunci – Flow Cytometry vs FACS
Dalam konteks teori sel, sel adalah unit struktural dan fungsional dasar dari semua organisme hidup. Penyortiran sel adalah metodologi yang digunakan untuk memisahkan sel yang berbeda sesuai dengan fitur fisiologis dan morfologis. Mereka dapat memiliki karakteristik intraseluler atau ekstraseluler. Interaksi DNA, RNA, dan protein dianggap sebagai sifat interaktif intraseluler sedangkan bentuk, ukuran dan protein permukaan yang berbeda dianggap sebagai sifat ekstraseluler. Dalam ilmu pengetahuan modern, metodologi pemilahan sel telah membantu penyelidikan yang berbeda dalam studi biologi dan juga dalam pembentukan prinsip-prinsip baru melalui penelitian kedokteran. Penyortiran sel dilakukan pada berbagai metodologi yang meliputi metodologi primitif dengan peralatan yang lebih sedikit dan metodologi teknologi canggih dengan penggunaan mesin yang canggih. Flow cytometry, penyortiran sel teraktivasi fluoresen (FACS), pemilihan sel magnetik dan penyortiran sel tunggal adalah metodologi utama yang digunakan. Flow cytometry dan FACS dikembangkan untuk membedakan sel sesuai dengan sifat optiknya. FACS adalah jenis khusus dari flow cytometry. Flow cytometry adalah metodologi yang digunakan selama analisis populasi sel yang heterogen menurut molekul permukaan sel yang berbeda, ukuran dan volume yang memungkinkan penyelidikan sel tunggal. FACS adalah proses di mana campuran sampel sel diurutkan menurut karakteristik hamburan cahaya dan fluoresensinya ke dalam dua wadah atau lebih. Inilah perbedaan utama antara flow cytometry dan FACS.
Apa itu Flow Cytometry?
Flow cytometry adalah metode yang digunakan untuk memeriksa dan menentukan ekspresi molekul intraseluler dan permukaan sel serta untuk menentukan dan mengkarakterisasi tipe sel yang berbeda. Hal ini juga digunakan dalam menentukan volume sel dan ukuran sel dan untuk mengevaluasi kemurnian subpopulasi yang diisolasi. Ini memungkinkan evaluasi multi-parameter sel tunggal pada waktu yang hampir bersamaan. Flow cytometry digunakan untuk mengukur intensitas fluoresensi yang dihasilkan karena antibodi berlabel fluoresen yang membantu mengidentifikasi protein atau ligan yang mengikat sel terkait.
Gambar 01: Aliran Sitometri
Secara umum, flow cytometry mencakup tiga sub sistem terutama. Mereka adalah fluidics, elektronik, dan optik. Dalam flow cytometry, tersedia lima komponen utama yang digunakan dalam pemilahan sel. Mereka adalah, sel aliran (aliran cairan yang digunakan untuk mengangkutnya dan menyelaraskan sel untuk proses penginderaan optik), sistem pengukuran (bisa dari sistem yang berbeda termasuk, lampu merkuri dan xenon, berpendingin air daya tinggi atau laser berpendingin udara daya rendah atau laser dioda), sebuah ADC; Analog to Digital Converter sistem, sistem amplifikasi dan komputer untuk analisis. Akuisisi adalah proses dimana data dikumpulkan dari sampel menggunakan flow cytometer. Proses ini dimediasi oleh komputer yang terhubung dengan flow cytometer. Perangkat lunak yang ada di komputer menganalisis informasi yang diumpankan ke komputer dari flow cytometer. Perangkat lunak ini juga memiliki kemampuan dalam mengatur parameter eksperimen yang mengontrol flow cytometer.
Apa itu FACS?
Dalam konteks Flow cytometry, Fluorescence-activated cell sorting (FACS) adalah metode yang digunakan dalam membedakan dan menyortir sampel campuran sel biologis. Sel-sel dipisahkan dari dua wadah atau lebih. Metode penyortiran didasarkan pada fitur fisik sel yang meliputi hamburan cahaya dan karakteristik fluoresensi sel. Ini adalah teknik ilmiah yang penting, yang dapat digunakan untuk mendapatkan hasil kuantitatif dan kualitatif yang andal dari sinyal fluoresensi yang dipancarkan dari setiap sel. Selama FACS, awalnya, campuran sel yang diperoleh sebelumnya; suspensi diarahkan ke pusat aliran sempit cairan yang mengalir dengan cepat. Aliran cairan dirancang untuk memisahkan sel-sel dalam suspensi berdasarkan diameter masing-masing sel. Mekanisme getaran diterapkan pada aliran suspensi yang menghasilkan pembentukan tetesan individu.
Gambar 02: FACS
Sistem dikalibrasi untuk membuat satu tetesan dengan satu sel. Tepat sebelum pembentukan tetesan, suspensi aliran bergerak di sepanjang alat pengukur fluoresensi yang mendeteksi karakteristik fluoresensi setiap sel. Pada titik pembentukan tetesan, cincin pengisian listrik ditempatkan di mana muatan diinduksi ke cincin sebelum pengukuran intensitas fluoresensi. Setelah tetesan terbentuk dari aliran suspensi, muatan terperangkap di dalam tetesan yang kemudian masuk ke dalam sistem defleksi elektrostatik. Menurut muatannya, sistem mengalihkan tetesan ke wadah yang berbeda. Metode penerapan muatan bervariasi sesuai dengan sistem yang berbeda yang digunakan dalam FACS. Peralatan yang digunakan di FACS dikenal sebagai penyortir sel yang diaktifkan fluoresensi.
Apa Persamaan Antara Flow Cytometry dan FACS?
Flow cytometry dan FACS dikembangkan untuk membedakan sel menurut sifat optiknya
Apa Perbedaan Antara Flow Cytometry dan FACS?
Flow Sitometri vs FACS |
|
| Flow cytometry adalah metodologi yang digunakan selama analisis populasi sel yang heterogen menurut molekul permukaan sel yang berbeda, ukuran dan volume yang memungkinkan penyelidikan sel tunggal. | FACS adalah proses di mana campuran sampel sel diurutkan menurut karakteristik hamburan cahaya dan fluoresensinya ke dalam dua wadah atau lebih. |
Ringkasan – Aliran Sitometri vs FACS
Sel adalah unit struktural dan fungsional dasar dari semua organisme hidup. Penyortiran sel adalah proses di mana sel diisolasi dan dibedakan ke dalam kategori yang berbeda berdasarkan sifat intraseluler dan ekstraselulernya. Flow cytometry dan FACS adalah dua metodologi penting dalam penyortiran sel. Kedua proses dikembangkan untuk membedakan sel sesuai dengan sifat optiknya. Flow cytometry adalah metodologi yang digunakan selama analisis populasi sel yang heterogen menurut molekul permukaan sel yang berbeda, ukuran dan volume yang memungkinkan penyelidikan sel tunggal. FACS adalah proses di mana campuran sampel sel diurutkan menurut karakteristik hamburan cahaya dan fluoresensinya ke dalam dua wadah atau lebih. Inilah perbedaan antara Flow Cytometry dan FACS.
Unduh Versi PDF dari Flow Cytometry vs FACS
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Flow Cytometry dan FACS
