Perbedaan Kunci – TLC vs HPTLC
TLC dan HPTLC adalah dua teknik kimia yang digunakan untuk memisahkan komponen yang tidak mudah menguap dalam suatu campuran. Perbedaan utama antara TLC dan HPTLC adalah bahwa bahan penyerap di pelat KLT memiliki partikel besar sedangkan pelat HPTLC memiliki partikel bahan penyerap yang sangat kecil.
TLC adalah kromatografi lapis tipis. HPTLC adalah kromatografi lapis tipis kinerja tinggi, yang merupakan teknik lanjutan jika dibandingkan dengan metode KLT.
Apa itu TLC?
KLT atau kromatografi lapis tipis adalah teknik kimia dasar yang digunakan untuk memisahkan komponen yang tidak mudah menguap dalam suatu campuran. Percobaan ini dilakukan dengan menggunakan lembaran kaca, plastik atau kertas. Lembaran ini dilapisi dengan lapisan tipis selulosa atau silika gel (bahan penyerap). Lapisan tipis ini dikenal sebagai fase diam KLT. Lembaran tersebut dikenal sebagai pelat TLC.
Sebelum percobaan, garis dasar dan garis atas ditandai dengan pensil di pelat KLT. Kemudian sampel terlihat di sepanjang garis ini menggunakan tabung kapiler. Setelah itu, pelat KLT ditempatkan secara vertikal dalam fase gerak. Fase gerak adalah pelarut (atau campuran pelarut) yang ditempatkan dalam wadah. Saat menempatkan pelat KLT dalam fase gerak ini, seseorang harus menjaga garis dasar di atas batas pelarut. Jika tidak, sampel akan larut dalam pelarut.
Plat TLC dibiarkan berada dalam fase gerak selama beberapa waktu. Kemudian, seiring waktu, fase gerak naik ke atas pelat karena aksi kapiler. Jika sampel larut dalam fase gerak, sampel akan naik ke atas seiring dengan fase gerak.
Prinsip “suka larut seperti” ada di balik metode TLC ini. Ini berarti senyawa polar larut dalam pelarut polar sedangkan senyawa nonpolar larut dalam pelarut nonpolar. Fase diam biasanya silika gel atau selulosa, yang merupakan senyawa polar. Fase gerak yang digunakan adalah pelarut nonpolar seperti heksana. Oleh karena itu, jika sampel mengandung komponen nonpolar, komponen ini akan bermigrasi ke atas bersama dengan fase gerak. Komponen kutub akan menempel pada pelat. Di antara komponen yang bergerak, senyawa nonpolar sedang akan bermigrasi dengan lambat sedangkan senyawa yang sangat nonpolar akan bermigrasi dengan cepat. Ketika bagian depan pelarut telah mencapai garis atas pelat TLC, pelat dikeluarkan dan dibiarkan kering.
Gambar 01: Teknik TLC
Jika komponen dalam sampel adalah senyawa berwarna, harus ada bintik-bintik warna-warni di piring di lokasi yang berbeda. Tetapi jika komponennya tidak berwarna, beberapa teknik lain harus digunakan; misalnya penyemprotan ninhidrin untuk mendeteksi adanya amonia atau amina (amina primer dan amina sekunder).
Apa itu HPTLC?
HPTLC atau kromatografi lapis tipis kinerja tinggi adalah bentuk lanjutan dari kromatografi lapis tipis (KLT). Resolusi dan akurasi HPTLC sangat tinggi. Sebagian besar langkah dari teknik ini dapat diotomatisasi.
Pelat yang digunakan dalam HPTLC mengandung partikel silika gel dengan ukuran yang sangat kecil dan kerapatan pengepakan gel pada pelat tinggi. Permukaan pelat halus dan memberikan pemisahan yang efisien. Analisisnya lebih cepat daripada teknik TLC. Sensitivitas metode ini juga tinggi. Dalam HPTLC, beberapa sampel yang berbeda dapat dipisahkan di piring yang sama tanpa langkah persiapan sampel.
Apa Perbedaan TLC dan HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC adalah kromatografi lapis tipis. | HPTLC adalah kromatografi lapis tipis kinerja tinggi. |
| Teknik | |
| Ini adalah teknik kimia dasar yang digunakan untuk memisahkan komponen yang tidak mudah menguap dalam suatu campuran. | Ini adalah bentuk lanjutan dari Kromatografi Lapis Tipis (KLT). |
| Piring | |
| Plat TLC dapat dibuat dari kertas, plastik atau kaca yang diaplikasikan dengan bahan adsorben yang memiliki partikel besar. | Pelat HPTLC memiliki partikel bahan penyerap yang sangat kecil. |
| Resolusi | |
| Metode TLC memberikan resolusi yang buruk ketika sampel memiliki komponen yang memiliki sifat serupa. | Metode HPTLC memberikan resolusi tinggi. |
| Waktu | |
| Teknik TLC adalah teknik yang memakan waktu. | HPTLC memberikan hasil pada kecepatan yang lebih tinggi daripada metode TLC. |
Ringkasan – TLC vs HPTLC
HPTLC adalah bentuk lanjutan dari TLC. Perbedaan utama antara TLC dan HPTLC adalah pelat KLT dapat dibuat dari kertas, plastik atau kaca yang diaplikasikan dengan bahan penyerap yang memiliki partikel besar sedangkan pelat HPTLC memiliki partikel bahan penyerap yang sangat kecil.
