Perbedaan Kunci – HPLC vs LCMS
Mari kita lihat dulu pengertian HPLC dan LCMS sebelum menganalisis perbedaan antara HPLC dan LCMS. Kromatografi adalah teknik pemisahan dalam analisis kimia di mana konstituen sampel dipisahkan selama perjalanan melalui media kromatografi. Ini juga melibatkan interaksi dengan sampel, fase diam, dan fase gerak. HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography, dan digunakan sebagai metode kromatografi cair dalam kimia analitik. Kombinasi Kromatografi Cair dan Spektroskopi Massa (LCMS) telah dikembangkan untuk analisis kuantitatif biomolekul terpilih dan merupakan prosedur pengujian yang sangat sensitif, akurat, dan spesifik dibandingkan dengan HPLC. Ini adalah perbedaan utama antara HPLC dan LCMC. Artikel ini akan memperkenalkan Anda kepada HPLC dan LCMC yang berhubungan dengan analisis kimia dan membahas perbedaan antara HPLC dan LCMS.
Apa itu HPLC?
Kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) adalah teknik pemisahan yang populer dalam kimia analitik. Hal ini terutama digunakan untuk memisahkan komponen, untuk mengidentifikasi dan mengukur setiap komponen dalam campuran. Sebelumnya, metode ini dikenal sebagai kromatografi cair tekanan tinggi karena bergantung pada pompa untuk mengalirkan pelarut cair bertekanan yang terdiri dari campuran sampel melalui kolom yang dikemas dengan bahan penyerap padat. Setiap konstituen dalam campuran sampel berinteraksi secara berbeda dengan bahan adsorben padat, yang menghasilkan laju aliran yang berbeda untuk konstituen yang berbeda. Hal ini dapat menyebabkan pemisahan konstituen saat mengalir keluar kolom HPLC.
HPLC telah digunakan untuk berbagai aplikasi seperti analisis kadar vitamin D dalam darah, penggunaan obat-obatan terlarang oleh atlet dengan mendeteksi residu obat dalam urin mereka, memilah konstituen sampel biologis kompleks untuk tujuan penelitian dan analisis dan pembuatan obat-obatan.
Apa itu LCMS?
Kromatografi cair–spektrometri massa (LCMS) adalah teknik analisis yang menggabungkan kemampuan pemisahan fisik kromatografi cair dengan kemampuan analisis massa spektrometri massa (MS). Kromatografi cair adalah teknik pemisahan, dan spektrometri massa digunakan untuk menganalisis rasio massa terhadap muatan partikel bermuatan. Pemisahan fisik biasanya dicapai dengan HPLC dan sebagai alternatif, LCMS juga dikenal sebagai HPLC-MS. LCMS merupakan teknik analisis dominan yang memiliki akurasi, sensitivitas, dan spesifisitas yang sangat tinggi dibandingkan dengan HPLC. Dengan demikian, ini berguna dalam banyak aplikasi seperti tujuan penelitian, analisis obat, analisis makanan, dll. LCMS terutama digunakan untuk memisahkan, mendeteksi, mengidentifikasi dan mengukur sifat biokimia dari sampel tertentu dengan adanya campuran kimia kompleks.
Apa perbedaan antara HPLC dan LCMC?
Akronim dan definisi HPLC dan LCMC
HPLC: HPLC adalah singkatan dari Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Ini adalah teknik pemisahan yang terutama digunakan untuk memisahkan komponen, untuk mengidentifikasi dan mengukur setiap komponen dalam campuran.
LCMS: LCMS adalah singkatan dari Kromatografi Cair dan Spektrometri Massa. Ini adalah teknik analisis yang menggabungkan kemampuan pemisahan fisik kromatografi cair dengan kemampuan analisis massa spektrometri massa (MS).
Karakteristik HPLC dan LCMC
Klasifikasi
HPLC: Ini adalah metode Kromatografi Cair saja.
LCMS: Ini adalah kombinasi dari metode Kromatografi Cair dan metode Spektrometri Massa.
Efisiensi
HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang efisien dan lebih lambat.
LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih efisien dan lebih cepat.
Sensitivitas
HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang sensitif.
LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih sensitif.
Kekhususan
HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang spesifik.
LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih spesifik.
Akurasi
HPLC: HPLC memberikan hasil yang kurang akurat dibandingkan LCMS untuk penentuan beberapa bahan kimia.
LCMS: LCMS memberikan hasil yang lebih akurat daripada HPLC untuk penentuan beberapa bahan kimia.
Komponen
HPLC: HPLC dapat dianggap sebagai komponen LCMS.
LCMS: LCMS tidak dapat dianggap sebagai komponen HPLC.
Sumber Ion
HPLC: Sumber ion tidak ada di instrumen HPLC.
LCMS: Sumber ion ada di instrumen LCMS.
Aplikasi
HPLC: Ion, polimer, molekul organik, dan biomolekul dapat dianalisis menggunakan HPLC.
LCMS: Molekul dan biomolekul organik dapat dianalisis. Berbeda dengan HPLC, LCMS dapat digunakan untuk memeriksa campuran yang tidak larut sempurna.
Operasi
HPLC: Diagram instrumen HPLC diberikan pada gambar 1, dan biasanya mencakup autosampler, pompa, dan detektor. Sampler memasukkan campuran sampel ke dalam fase gerak (campuran bertekanan dari pelarut seperti air, asetonitril dan/atau metanol) yang memindahkannya ke kolom. Pompa memberikan aliran dan komposisi fase gerak yang diinginkan melalui kolom. Kolom diisi dengan adsorben, yang merupakan partikel padat berbutir seperti silika atau polimer. Detektor menghasilkan sinyal sebanding dengan jumlah kehadiran konstituen sampel dalam kolom, oleh karena itu memungkinkan untuk analisis kuantitatif dari konstituen sampel yang dipilih. Instrumen HPLC dikendalikan, dan analisis data disediakan oleh mikroprosesor digital dan perangkat lunak pengguna.
Gambar 1: Diagram instrumen HPLC
LCMS: Diagram instrumen LCMS diberikan pada gambar 2. Ekstrak sampel dimasukkan ke dalam kolom yang terdiri dari HPLC. Kolom ini menyimpan metabolit sampel berdasarkan karakter fisik, dan metabolit yang berbeda mengalir ke spektrometer massa pada interval waktu yang berbeda. Spektroskopi massa digunakan untuk menilai massa partikel, untuk menentukan susunan unsur molekul, dan untuk memperjelas struktur molekul. Namun, sampel harus diionisasi untuk menghasilkan molekul bermuatan untuk menentukan rasio massa terhadap muatannya. Oleh karena itu, alih-alih instrumen HPLC, LCMS terdiri dari tiga modul tambahan seperti sumber besi, penganalisis massa, dan detektor. Sumber ion dapat mengubah sampel fase gas menjadi ion dan penganalisis massa mengelompokkan ion berdasarkan massanya menggunakan medan elektromagnetik. Akhirnya, detektor mengkuantifikasi nilai dan mengirimkan data dari setiap ion yang ada dalam sampel. Teknik LCMS dapat digunakan untuk aplikasi kualitatif dan kuantitatif.
Gambar 2: Diagram instrumen LCMS
Kesimpulannya, HPLC adalah metode kromatografi cair sedangkan LCMS adalah kombinasi dari kromatografi cair dan spektrometri massa. Kedua teknik analisis ini memiliki karakteristik yang berbeda, tetapi dapat digunakan untuk mengidentifikasi dan mengukur komposisi makanan, obat-obatan, dan molekul bioaktif lainnya.
