Elektroforesis vs Elektroosmosis
Metode pemisahan fisik seperti penyaringan, distilasi, kromatografi kolom bukanlah metode yang mudah untuk pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis adalah dua teknik pemisahan lain yang dapat digunakan untuk memisahkan partikel bermuatan.
Apa itu Elektroforesis?
Elektroforesis adalah teknik pemisahan molekul berdasarkan ukurannya. Dasar untuk pemisahan ini adalah muatan molekul dan kemampuannya untuk bergerak dalam medan listrik. Ini adalah teknik yang paling umum dan utama dalam biologi molekuler untuk memisahkan molekul, terutama DNA dan protein. Ini sebagian besar digunakan karena relatif mudah dan murah. Peralatan untuk elektroforesis dapat sedikit rumit, dan persiapannya membutuhkan waktu. Tetapi kita dapat dengan mudah membuat alat elektroforesis dari bahan-bahan yang kita miliki di laboratorium. Teknik elektroforesis dapat bervariasi tergantung pada tujuan kita. Kita dapat menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan bila diperlukan sampel yang lebih jernih (seperti dalam kasus sidik jari). Gel digunakan sebagai media pendukung untuk memisahkan molekul. Gel ini dapat dibuat sebagai lembaran datar atau dalam tabung. Dasar dari prosedur ini adalah untuk memisahkan molekul tergantung pada laju pergerakannya melalui gel ketika medan listrik disuplai. Molekul bermuatan negatif seperti DNA cenderung bergerak menuju kutub positif dalam medan listrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung bergerak ke kutub negatif. Dua jenis gel yang digunakan dalam elektroforesis adalah agarosa dan poliakrilamida. Keduanya memiliki kekuatan penyelesaian yang berbeda. Gel bertindak sebagai saringan untuk menyaring berbagai ukuran molekul. Muatan elektrostatis yang terbentuk dalam gel bertindak sebagai gaya.
Pemisahan tergantung pada mobilitas ion.
F=fv=ZeE
V=ZeE/ f
F=gaya yang bekerja pada partikel
f=koefisien gesekan
V=kecepatan migrasi rata-rata
Z=muatan partikel yang bermigrasi
e=muatan dasar
E=kuat medan listrik
Kondisi yang diperlukan untuk elektroforesis relatif sederhana. Saat membuat gel dan menjalankan sampel, buffer digunakan. Spidol dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apa itu Elektro-osmosis?
Ini adalah proses memindahkan cairan melalui bahan menggunakan medan listrik yang diterapkan. Pergerakannya bisa melalui bahan berpori, sepanjang kapiler, membran dll. Ini dapat digunakan sebagai teknik pemisahan (terutama elektro-osmosis kapiler). Kecepatan cairan berbanding lurus dengan medan listrik yang diterapkan. Itu juga tergantung pada bahan yang digunakan untuk membangun saluran dan solusi yang digunakan. Dalam antarmuka, larutan dan bahan telah memperoleh muatan yang berlawanan dan, ini dikenal sebagai lapisan ganda listrik. Ketika medan listrik diterapkan pada larutan, lapisan ganda listrik bergerak dengan gaya Coulomb yang dihasilkan. Ini dikenal sebagai aliran elektro-osmotik.
Apa perbedaan antara Elektroforesis dan Elektro-osmosis?
• Dalam elektroforesis, partikel padat (makromolekul seperti asam nukleat atau protein) dipindahkan menggunakan medan listrik. Tapi dalam elektro-osmosis cairan bergerak.
• Dalam elektroforesis, bahan padat pendukung adalah gel. Tapi itu elektro-osmosis bisa berupa gel, membran, kapiler, dll.
