Perbedaan utama antara amplifikasi gen dan kloning gen adalah bahwa amplifikasi gen adalah proses membuat banyak salinan gen yang diinginkan secara in vitro melalui reaksi berantai polimerase. Namun, kloning gen adalah proses membuat banyak salinan gen yang diinginkan secara in vivo dengan membuat plasmid rekombinan dan mengubahnya menjadi bakteri inang.
Gen adalah fragmen spesifik DNA yang mengkode protein. Suatu organisme memiliki ribuan gen. Selain itu, dimungkinkan untuk menggandakan urutan DNA gen penting menggunakan teknik biologi molekuler. Amplifikasi gen dan kloning gen adalah dua prosedur tersebut. Kedua prosedur menghasilkan banyak salinan gen yang diinginkan. Namun, ada perbedaan antara amplifikasi gen dan kloning gen dalam hal metodologinya.
Apa itu Amplifikasi Gen?
Amplifikasi gen adalah proses membuat salinan gen tertentu menggunakan reaksi berantai polimerase. Untuk mengamplifikasi gen, DNA dari organisme tertentu harus diekstraksi menggunakan protokol ekstraksi DNA yang tepat. Kemudian DNA untai ganda yang diekstraksi harus didenaturasi untuk mendapatkan untaian tunggal yang terpisah. Langkah selanjutnya termasuk menggunakan reaksi PCR untuk membuat salinan gen yang diinginkan. Selanjutnya, campuran PCR mengandung primer yang dibutuhkan, nukleotida, enzim DNA polimerase, DNA template dan bahan lainnya. Di akhir program RRC, terjadi amplifikasi gen yang diinginkan.
Gambar 01: Amplifikasi Gen
Selanjutnya, amplifikasi gen merupakan langkah awal dalam mendeteksi sekuens tertentu, identifikasi suatu organisme, mendiagnosis penyakit dan membuat pustaka gen, dll.
Apa itu Kloning Gen?
Kloning gen adalah metode dalam rekayasa genetika untuk membuat perpustakaan gen atau membuat banyak salinan gen yang diinginkan. Proses ini melibatkan pembuatan plasmid rekombinan dan transformasi plasmid rekombinan menjadi sel inang, terutama sel bakteri. Klon adalah salinan identik dari organisme atau molekul asli. Kloning gen dapat membuat ribuan klon gen.
Gambar 02: Kloning Gen
Setelah gen yang diinginkan diidentifikasi, gen tersebut dapat dipisahkan dari genom organisme tertentu dengan membatasinya dengan enzim restriksi spesifik. Kemudian dengan menggunakan enzim restriksi yang sama, plasmid (vektor) harus dibuka untuk menyisipkan fragmen gen. Kemudian plasmid rekombinan diubah menjadi bakteri inang menggunakan metode yang berbeda seperti elektroporasi. Beberapa plasmid rekombinan masuk ke dalam sel bakteri inang. Dengan menggunakan antibiotik, bakteri yang ditransformasi dapat diseleksi, diisolasi dan dibudidayakan dalam media segar. Dengan demikian, teknik ini membantu untuk mendapatkan jutaan klon gen.
Apa Persamaan Antara Amplifikasi Gen dan Kloning Gen?
- Amplifikasi gen dan kloning gen adalah dua teknik biologi molekuler.
- Dalam kedua teknik ini, urutan DNA atau gen tertentu berlipat ganda dalam jutaan atau ribuan kali.
- Selain itu, kedua teknik ini sangat penting bagi banyak bidang ilmiah.
Apa Perbedaan Amplifikasi Gen dan Kloning Gen?
Amplifikasi gen adalah proses yang membuat salinan gen tertentu menggunakan metode in vitro yang disebut PCR. Di sisi lain, kloning gen adalah proses yang membuat salinan gen tertentu menggunakan metode in vivo melalui konstruksi vektor rekombinan dan mengalikannya dalam organisme hidup. Jadi, inilah perbedaan utama antara amplifikasi gen dan kloning gen. Selanjutnya, amplifikasi gen hanya membutuhkan beberapa jam sementara kloning gen membutuhkan beberapa hari untuk diselesaikan. Oleh karena itu, kita dapat menganggap ini juga sebagai perbedaan antara amplifikasi gen dan kloning gen. Selain itu, proses amplifikasi gen menunjukkan lebih sedikit kesalahan, sedangkan proses kloning gen menunjukkan lebih banyak kesalahan.
Infografik berikut merangkum perbedaan antara amplifikasi gen dan kloning gen.
Ringkasan – Amplifikasi Gen vs Kloning Gen
Amplifikasi gen adalah proses membuat salinan gen yang diinginkan menggunakan reaksi berantai polimerase dalam kondisi in vitro sedangkan kloning gen adalah proses membuat salinan gen yang diinginkan menggunakan molekul DNA rekombinan dan organisme/inang hidup bakteri. Jadi, inilah perbedaan mendasar antara amplifikasi gen dan kloning gen.
