Perbedaan utama antara isolasi DNA dan RNA adalah bahwa isolasi DNA adalah prosedur di mana jenis asam nukleat yang disebut DNA diekstraksi dari sel biologis, sedangkan isolasi RNA adalah prosedur di mana jenis asam nukleat yang disebut RNA diekstraksi diekstraksi dari sel biologis.
Isolasi asam nukleat adalah titik awal dalam beragam aplikasi hilir. Kualitas tinggi asam nukleat dalam sampel awal merupakan faktor kunci keberhasilan aplikasi hilir berikutnya. Isolasi asam nukleat dapat didefinisikan sebagai serangkaian langkah untuk mendapatkan asam nukleat dalam sampel kemurnian yang dapat digunakan untuk berbagai langkah aplikasi hilir. Tujuan ekstraksi asam nukleat adalah untuk menghancurkan membran sel dan mencapai eliminasi maksimum lipid dan protein untuk mendapatkan asam nukleat murni seperti DNA atau RNA.
Apa itu Isolasi DNA?
Isolasi DNA adalah prosedur rutin di mana sejenis asam nukleat yang disebut DNA diekstraksi dari sel biologis. Isolasi DNA dilakukan dengan mengekstraksi DNA dari darah, sampel jaringan beku, dan blok jaringan parafin. Ada tiga langkah utama dalam isolasi DNA, termasuk lisis sel, ekstraksi DNA, dan pengendapan. Dalam lisis sel, sel-sel dalam sampel dipisahkan satu sama lain seringkali dengan cara fisik seperti penggilingan atau vortexing dan dimasukkan ke dalam larutan yang mengandung garam. Biasanya, ion natrium bermuatan positif dalam garam membantu melindungi gugus fosfat bermuatan negatif yang berjalan di sepanjang tulang punggung DNA. Kemudian, deterjen ditambahkan untuk memecah lipid dalam membran sel dan inti, yang melepaskan DNA karena membran ini terganggu.
Gambar 01: Isolasi DNA
Ekstraksi DNA dilakukan untuk mendapatkan sampel DNA yang bersih. Seringkali, enzim protease ditambahkan untuk mendegradasi protein terkait DNA dan protein seluler lainnya. Selain itu, beberapa puing seluler dapat dihilangkan dengan menyaring sampel. Akhirnya, DNA diendapkan dengan menggunakan alkohol. Selanjutnya, jika ada banyak DNA, endapan putih pelit di akhir prosedur dapat diamati.
Apa itu Isolasi RNA?
RNA isolasi adalah prosedur di mana jenis asam nukleat yang disebut RNA diekstraksi dari sel biologis. Prosedur ini sering diperumit dengan adanya enzim ribonuklease dalam sel dan jaringan yang mendegradasi RNA. Beberapa metode yang digunakan dalam biologi molekuler untuk mengisolasi RNA dari sampel, seperti ekstraksi guanidinium-tiosianat-fenol-kloroform.
Gambar 02: Isolasi RNA
Isolasi RNA biasanya terdiri dari beberapa langkah, termasuk lisis sel dan homogenisasi, pendinginan proses biokimia, partisi asam nukleat, pengambilan RNA, pemurnian mentah, dan penilaian kualitas RNA. Metode lisis dan elusi berbasis kertas saring memiliki kapasitas throughput yang tinggi dalam ekstraksi RNA. Selain itu, ekstraksi RNA dalam nitrogen cair dengan menggunakan lesung dan alu juga merupakan metode yang sangat berguna karena mencegah aktivitas ribonuklease.
Apa Persamaan Isolasi DNA dan RNA?
- Isolasi DNA dan RNA adalah dua jenis prosedur isolasi asam nukleat.
- Kedua prosedur memiliki langkah dasar yang sama, seperti lisis sel, ekstraksi, dan pemurnian.
- Prosedur ini mengisolasi jenis asam nukleat penting yang memiliki sejumlah aplikasi hilir.
- Dilakukan di laboratorium.
- Mereka dapat dilakukan menggunakan kit yang diproduksi.
Apa Perbedaan Isolasi DNA dan RNA?
Dalam isolasi DNA, sejenis asam nukleat yang disebut DNA diekstraksi dari sel biologis, sedangkan dalam isolasi RNA, sejenis asam nukleat yang disebut RNA diekstraksi dari sel biologis. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara isolasi DNA dan RNA. Selanjutnya, isolasi DNA biasanya dilakukan pada sekitar pH 7 hingga 8 sedangkan isolasi RNA biasanya dilakukan pada sekitar pH 4,5.
Infografik di bawah ini menyajikan perbedaan isolasi DNA dan RNA dalam bentuk tabel untuk perbandingan berdampingan.
Ringkasan – Isolasi DNA vs RNA
Isolasi DNA dan RNA adalah dua jenis prosedur isolasi asam nukleat. Isolasi DNA adalah prosedur di mana DNA diekstraksi dari sel biologis. Isolasi RNA adalah prosedur di mana RNA diekstraksi dari sel biologis. Jadi, inilah perbedaan utama antara isolasi DNA dan RNA.