Perbedaan utama antara uji mikronukleus dan komet adalah bahwa uji mikronukleus penting untuk memeriksa kerusakan kromosom sebagai akibat paparan mutagen, sedangkan uji komet penting untuk mendeteksi kerusakan DNA primer pada sel individu.
Tes genotoksisitas membantu menilai kemungkinan mutasi dan kelainan kromosom. Genotoksin meliputi zat kimia dan radiasi. Karsinogen, mutagen, dan teratogen adalah kategori utama genotoksin. Mereka menyebabkan berbagai kerusakan seperti mutasi titik, penghapusan, pemutusan untai tunggal dan ganda, penyimpangan kromosom, pembentukan mikronukleus, perbaikan DNA, dan interaksi siklus sel. Kondisi seperti itu dapat menyebabkan berbagai macam penyakit, dan uji genotoksisitas mencegah potensi kerusakan dari kondisi ini. Uji mikronukleus dan uji komet adalah dua teknik di bawah uji genotoksisitas.
Apa itu Uji Mikronukleus?
Micronucleus assay adalah uji untuk menilai kerusakan kromosom akibat paparan mutagen. Penting dalam menyaring bahan kimia yang menyebabkan pembentukan gelendong dan mikronukleus. Uji mikronukleus memberikan informasi tentang stabilitas bahan kimia ketika mengganggu struktur dan fungsi kromosom. Banyak karsinogen tes positif dalam tes mikronukleus. Proses pengujian melibatkan perlakuan kimia dan pengukuran frekuensi sel berinti mikro. Jika ada peningkatan abnormal dalam jumlah sel mikronukleus, disimpulkan bahwa bahan kimia tersebut menyebabkan kerusakan kromosom.
Pemeriksaan mikronukleus biasanya dilakukan pada sel yang aktif membelah. Oleh karena itu, eritrosit dan sel punca sumsum tulang yang dihasilkan melalui pembelahan sel merupakan kandidat ideal untuk pengujian tersebut. Mereka mengalami perputaran yang konstan dan cepat. Karena eritrosit tidak memiliki inti sejati, hal itu membuat sel berinti mikro lebih terlihat di akhir pengujian.
Gambar 01: Pengamatan Uji Mikronukleus
Uji mikronukleus ekonomis, lebih cepat, nyaman, dan membutuhkan lebih sedikit keterampilan untuk dilakukan. Mereka mencerminkan penyimpangan kromosom dengan cepat dengan cara yang andal dan sangat berguna untuk menilai kerusakan kromosom dengan cepat. Jenis uji mikronukleus yang khusus dan serbaguna adalah uji sitokinesis blok micronucleus cytome (CBMNcyt). Ini adalah tes yang lebih disukai untuk mengukur kerusakan kromosom dan ketidakstabilan dalam sel. Namun, masalah utama menggunakan uji mikronukleus adalah bahwa ia tidak dapat menentukan berbagai jenis penyimpangan kromosom, dan pengujian tersebut memiliki pengaruh pada tingkat mitosis dan proporsi kematian sel, yang menyebabkan hasil berubah.
Apa itu Uji Komet?
Tes komet, yang juga dikenal sebagai uji elektroforesis gel tunggal, adalah teknik sederhana dan sensitif untuk mendeteksi kerusakan DNA. Ini mengukur kerusakan DNA dalam sel eukariotik dan merupakan teknik standar untuk biomonitoring dan pengujian genotoksisitas.
Tes komet terlibat dalam enkapsulasi sel dalam suspensi agarosa dengan titik leleh rendah, lisis sel dalam kondisi netral atau basa, dan elektroforesis sel lisis tersuspensi. Selama proses enkapsulasi, sel-sel disuspensikan dalam agarosa dengan titik leleh rendah cair, dan agarosa membentuk matriks serat karbohidrat untuk menambatkannya pada tempatnya. Agarosa secara osmotik netral; oleh karena itu, memungkinkan larutan menembus gel dan mempengaruhi sel tanpa mengganggu dan menggesernya. Larutan lisis adalah larutan garam berair yang sangat pekat dan deterjen. Garam ini mengganggu protein dan pola ikatan di dalam sel sekaligus mengganggu kandungan RNA sel. Sel-sel hancur, dan semua protein, RNA, sitoplasma dan konstituen nukleoplasma, mengganggu dan berdifusi ke dalam matriks agarosa, meninggalkan DNA.
Gambar 02: Uji Komet
Larutan elektroforesis adalah larutan basa di mana DNA heliks ganda terdenaturasi, dan nukleoid menjadi untai tunggal. Selama proses ini, medan listrik diterapkan untuk menganalisis gambar. Analisis gambar mengukur intensitas keseluruhan fluoresensi untuk DNA dan nukleoid dan membandingkan keduanya. Struktur keseluruhannya menyerupai komet dengan kepala melingkar yang sesuai dengan sisa DNA yang tidak rusak dan ekor untuk DNA yang rusak. Semakin terang dan panjang ekornya karena sinyal yang lebih kuat, semakin tinggi tingkat kerusakannya.
Apa Persamaan Antara Mikronukleus dan Uji Komet?
- Micronucleus dan uji komet ekonomis, lebih cepat, nyaman, dan membutuhkan lebih sedikit keterampilan.
- Mereka terutama dilakukan pada DNA.
- Kedua tes membantu dalam menilai mutasi dan kelainan kromosom.
- Selain itu, kedua teknik menggunakan bahan kimia untuk melakukan prosedur.
Apa Perbedaan Antara Mikronukleus dan Uji Komet?
Uji mikronukleus penting dalam memeriksa kerusakan kromosom akibat paparan mutagen, sedangkan uji komet penting dalam mendeteksi kerusakan DNA primer dalam sel individu. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara uji mikronukleus dan komet. Juga, uji mikronukleus sudah mapan untuk mendeteksi klastogenisitas dan aneugesitas. Uji komet digunakan sebagai uji genotoksisitas untuk mendeteksi kerusakan DNA primer dalam sel. Selain itu, uji mikronukleus memberikan informasi tentang stabilitas bahan kimia, sedangkan uji komet adalah elektroforesis gel sel tunggal.
Infografik di bawah ini menyajikan perbedaan antara uji mikronukleus dan komet dalam bentuk tabel untuk perbandingan berdampingan.
Ringkasan – Micronucleus vs Comet Assay
Tes genotoksisitas membantu menilai kemungkinan mutasi dan kelainan kromosom. Uji mikronukleus dan uji komet adalah dua teknik di bawah uji genotoksisitas. Uji mikronukleus menilai kerusakan kromosom sebagai akibat dari paparan mutagen. Uji komet adalah teknik sederhana dan sensitif untuk mendeteksi kerusakan DNA. Jadi, inilah perbedaan utama antara uji mikronukleus dan komet. Uji mikronukleus penting dalam penyaringan bahan kimia yang menyebabkan pembentukan gelendong dan mikronukleus. Uji komet terlibat dalam enkapsulasi sel dalam suspensi agarosa dengan titik leleh rendah, lisis sel dalam kondisi netral atau basa, dan elektroforesis sel lisis tersuspensi.
