Perbedaan utama antara radioimmunoassay dan immunoradiometric assay adalah bahwa dalam radioimmunoassay, sampel atau senyawa yang akan diukur digabungkan dengan antigen radioaktif sebelum digabungkan, sedangkan pada pengujian imunoradiometrik, sampel atau senyawa segera bergabung dengan radiolabeled antibodi.
Imunoassay adalah tes biokimia yang mendeteksi keberadaan atau konsentrasi makromolekul dalam larutan menggunakan antibodi atau antigen. Antibodi fluoresen dan radioaktif digunakan untuk mengukur antigen dalam sampel. Awalnya, antibodi digunakan dalam teknik presipitasi seperti imunopresipitasi, imunodifusi dan elektroforesis imun untuk analisis protein serum. Saat ini, teknik yang sangat sensitif seperti radioimmunoassay dan immunoradiometric assays digunakan untuk pengukuran obat, penanda tumor, dan hormon.
Apa itu Radioimmunoassay Assay?
Radioimmunoassay (RIA) adalah immunoassay yang menggunakan elemen radioaktif pembentukan kompleks antigen-antibodi bertahap. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif untuk mendeteksi jumlah antigen dalam sampel. RIA adalah uji in vitro yang sangat spesifik dan sangat sensitif. Prinsip di balik RIA adalah pengikatan kompetitif. Di sini, antigen radioaktif bersaing dengan antigen non-radioaktif untuk jumlah antibodi atau situs pengikatan reseptor yang konstan. RIA memerlukan lisensi dan tindakan pencegahan khusus karena zat radioaktif digunakan, dan teknik ini tetap merupakan salah satu teknik yang paling murah.
Gambar 01: Immunoassay
Selama RIA, sejumlah antigen yang diketahui sering dibuat radioaktif dengan melabelinya dengan isotop radioaktif gamma yodium yang melekat pada tirosin. Kemudian antigen ini digabungkan dengan jumlah antibodi yang diketahui. Di sini, baik antigen dan antibodi secara khusus mengikat satu sama lain. Kemudian, sampel serum darah ditambahkan untuk memulai reaksi kompetitif antara antigen berlabel dan antigen tidak berlabel dalam serum dengan antibodi spesifik. Dalam reaksi ini, antibodi melepaskan sejumlah antigen berlabel. Jumlah ini sebanding dengan rasio antigen berlabel dan tidak berlabel. Akhirnya, kurva pengikatan dibuat untuk mendapatkan jumlah antigen dalam serum darah pasien.
Apa itu Pemeriksaan Imunoradiometrik?
Immunoradiometric assay (IRMA) adalah immunoassay yang menggunakan antibodi berlabel radio. Dalam IRMA, antibodi diberi label menggunakan radioisotop. Antibodi ini mengikat antigen yang ada dalam sampel tertentu. Dalam sampel positif, antibodi yang berlabel radioaktif mengikat epitop antigen bebas. Ini membentuk kompleks antigen-antibodi.
Selama reaksi kedua, antibodi berlabel yang tidak terikat dihilangkan menggunakan antigen fase padat. Jumlah antibodi radioaktif yang tersisa dalam larutan adalah fungsi langsung dari konsentrasi antigen. IRMA dikenal sebagai uji reagen berlebih di mana jumlah antibodi radiolabeled yang berlebihan digunakan sebagai reagen. Di sini, kelebihan konsentrasi antibodi atau antigen berlabel dibiarkan bereaksi. Sebagai langkah terakhir, antibodi yang terikat antigen dan antibodi bebas dipisahkan, dan fraksi yang terikat antigen dikenai uji radioaktif. Di sini, aktivitas fraksi berbanding lurus dengan konsentrasi antigen.
Apa Persamaan Antara Radioimmunoassay dan Immunoradiometric Assay?
- Baik radioimmunoassay maupun immunoradiometric assay adalah immunoassay yang menggunakan elemen radioaktif dalam pembentukan kompleks antigen-antibodi secara bertahap.
- Mereka membentuk kompleks antigen-antibodi.
Apa Perbedaan Antara Radioimmunoassay dan Immunoradiometric Assay?
Radioimmunoassay adalah immunoassay yang menentukan kadar antibodi oleh antigen berlabel radioisotop sedangkan assay imunoradiometrik adalah assay reagen berlebih yang menggunakan konsentrasi berlebih dari antibodi radiolabeled. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara uji radioimmunoassay dan imunoradiometrik. IRMA mampu memberikan sensitivitas yang lebih tinggi dari RIA. Di RIA, antigen diberi label dengan isotop gamma-radioaktif yodium sedangkan di antibodi IRMA, diberi label menggunakan isotop yodium. Jadi, ini juga perbedaan antara uji radioimmunoassay dan imunoradiometrik. Karena IRMA adalah teknik reagen berlebih, pengujian dilakukan dalam waktu yang lebih singkat daripada RIA.
Tabel berikut merangkum perbedaan antara uji radioimmunoassay dan imunoradiometrik.
Ringkasan – Radioimmunoassay vs Immunoradiometric Assay
Radioimmunoassay adalah immunoassay yang menggunakan elemen radioaktif dalam pembentukan bertahap untuk menentukan tingkat antibodi. RIA biasanya menggunakan antibodi radioaktif. Antigen radioaktif bersaing dengan antigen non-radioaktif untuk jumlah antibodi atau situs pengikatan reseptor yang konstan. Immunoradiometric assay adalah immunoassay yang dilakukan untuk menentukan kadar antigen sampel menggunakan antibodi berlabel radio. Antibodi ini mengikat antigen yang ada dalam sampel tertentu. Pada akhir setiap pengujian, kompleks antigen-antibodi terbentuk. Untuk mendapatkan hasil pengujian, kurva pengikatan digambar. Dalam radioimmunoassay, jumlah antigen berlabel sebanding dengan rasio antigen berlabel dan tidak berlabel, tetapi dalam uji imunoradiometrik, aktivitas fraksi terikat antigen berbanding lurus dengan konsentrasi antigen. Ini adalah ringkasan perbedaan antara uji radioimmunoassay dan imunoradiometrik.
