Perbedaan utama antara HPLC dan UPLC adalah bahwa HPLC memungkinkan analisis partikel yang berukuran sekitar 5 mikrometer sedangkan UPLC memungkinkan partikel yang jauh lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
HPLC dan UPLC keduanya merupakan teknik Kromatografi Cair yang berguna untuk memisahkan komponen suatu senyawa. Untuk mengetahui perbedaan antara HPLC dan UPLC, pertama-tama kita perlu mengetahui apa itu HPLC. Hal ini karena UPLC adalah versi khusus dari HPLC dan kita dapat dengan mudah memahaminya jika kita mengetahui apa itu HPLC.
Apa itu HPLC?
Istilah HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography. Ini adalah teknik yang dapat kita gunakan untuk memisahkan konstituen yang berbeda dari suatu senyawa. Juga, ini adalah teknik yang paling banyak digunakan untuk mengidentifikasi, mengukur, dan memisahkan komponen campuran. Selain itu, teknik ini menggunakan tekanan tinggi untuk mendorong pelarut melalui kolom. Selanjutnya, aplikasi utama HPLC adalah dalam biokimia untuk analisis konstituen suatu senyawa. Ini adalah cara yang ideal untuk pemisahan dan identifikasi asam amino, asam nukleat, protein, hidrokarbon, pestisida, karbohidrat, antibiotik, steroid dan zat anorganik lainnya yang tak terhitung jumlahnya.
Gambar 01: Sistem HPLC di Laboratorium
Secara ringkas cara kerja teknik HPLC adalah sebagai berikut. Pertama, kita harus memasukkan sampel ke dalam aliran fase gerak dalam jumlah kecil yang terpisah menggunakan pompa. Tekanan pompa harus dipertahankan pada 40 MPa. Kemudian, aliran fase gerak ini meresap melalui kolom HPLC. Juga, komponen dalam sampel melewati kolom. Namun, kecepatan gerakan mereka berbeda satu sama lain. Perbedaan ini muncul karena adanya perbedaan interaksi antara komponen sampel dan adsorben di dalam kolom. Kami menyebut adsorben ini sebagai fase diam karena berada di dalam kolom (tidak bergerak). Kedua, pada akhir kolom, kita dapat mengumpulkan sampel yang terelusi dari kolom. Di sana kita dapat menentukan perbedaan waktu retensi untuk setiap komponen dalam sampel.
Apa itu UPLC?
Istilah UPLC adalah singkatan dari Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Ini adalah variasi dari HPLC, tetapi metode operasinya sama. Namun, tidak seperti HPLC, metode ini memungkinkan partikel yang sangat kecil untuk dianalisis, seperti partikel kecil berukuran 2 mikrometer.
Gambar 02: Perangkat UPLC
Selain itu, ini memberikan analisis yang lebih cepat. Dalam teknik ini, kami menggunakan tekanan pompa 100 MPa untuk penyisipan sampel ke dalam kolom. Oleh karena itu, tekanan tinggi ini menegaskan bahwa seluruh sampel dimasukkan ke dalam kolom. Dengan demikian, ini sangat efisien dibandingkan dengan HPLC.
Apa Perbedaan Antara HPLC dan UPLC?
Istilah HPLC adalah singkatan dari High Performance Liquid Chromatography sedangkan istilah UPLC adalah singkatan dari Ultra High Performance Liquid Chromatography. Oleh karena itu, teknik UPLC merupakan versi pengembangan dari HPLC. Dengan demikian, metode operasinya sama untuk kedua teknik tersebut. Namun, UPLC lebih efisien dibandingkan dengan HPLC karena menggunakan tekanan pompa yang tinggi; tekanan pompa untuk HPLC adalah 40 MPA sedangkan untuk UPLC 100 MPa. Oleh karena itu, ini adalah perbedaan antara HPLC dan UPLC. Di atas segalanya, perbedaan utama antara HPLC dan UPLC adalah bahwa HPLC memungkinkan analisis partikel yang berukuran sekitar 5 mikrometer sedangkan UPLC memungkinkan partikel yang jauh lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
Ringkasan – HPLC vs UPLC
UPLC adalah bentuk HPLC. Dengan demikian, metode operasinya sama. Namun, kami dapat menemukan beberapa fitur yang ditingkatkan di UPLC dibandingkan dengan HPLC. Oleh karena itu, ada beberapa perbedaan antara HPLC dan UPLC. Namun, perbedaan utama antara HPLC dan UPLC adalah bahwa HPLC memungkinkan analisis partikel yang berukuran sekitar 5 mikrometer sedangkan UPLC memungkinkan partikel yang jauh lebih kecil sekitar 2 mikrometer.
